Сайт упрощенка 26 2 ru: Профессионал в области пррименения УСН

Содержание

Профессионал в области пррименения УСН

Уважаемые предприниматели!

 

Приглашаем вас принять участие в конкурсе «Профессионал в области применения УСН», совместном проекте журнала «Упрощёнка» и Минфина России.

Этот конкурс впервые в России  проводится именно для тех, кто ведет налоговый учет по УСН. Несмотря на свое название, «упрощёнка» имеет множество подводных камней, и специалисты по применению УСН высоко ценятся и очень востребованны!

В конкурсе могут принять участие все желающие проверить свои знания в применении упрощенной системы налогообложения. А также те, кто хочет подтвердить свои познания и опыт в применении УСН с помощью государственных сертификатов.

Председатель жюри конкурса – Ю.В. Подпорин, заместитель начальника отдела специальных налоговых режимов Департамента налоговой и таможенно-тарифной политики Минфина России. Кроме того, в состав жюри входят М.

С. Скиба – эксперт отдела специальных налоговых режимов Департамента налоговой и таможенно-тарифной политики Минфина России, представители ФНС России, независимые эксперты и аудиторы, а также редакция журнала «Упрощёнка».

«Высокий профессионализм и квалификация бухгалтера — одни из самых важных факторов для успешного ведения бизнеса. Я надеюсь, что такое прекрасное начинание журнала «Упрощёнка», как конкурс для профессионалов в области УСН, будет способствовать росту числа профессиональных бухгалтеров–“упрощенцев”».  

Ю.В. Подпорин

Конкурс пройдет  с мая  по сентябрь 2010 года. Он будет состоять из трех этапов, на которых участникам предложат ответить на ряд профессиональных вопросов, а также решить практические задачи. Каждый этап конкурса  можно пройти в онлайн-режиме на сайте www.26-2.ru. Также мы предусмотрели буклеты-бланки для отправки в редакцию через Почту России по указанному на бланках адресу.

Этап первый

На первом этапе участникам программы предлагается 30 профессиональных вопросов с вариантами ответов. За каждый правильный ответ начисляется 3 балла.  Первый этап пройдет с 11 мая по 15 июля 2010 года.

Этап второй

На втором этапе участникам программы предлагается 15 числовых задач с вариантами ответов. За каждый правильный ответ начисляется

10 баллов.

О начале второго этапа и сроках проведения участники будут дополнительно уведомлены электронным письмом. Задания этапа будут размещены на сайте конкурса www.26-2.ru .

Этап третий

На третьем этапе участникам программы предлагается для решения 10 практических задач, на которые нужно дать ответ в числовом выражении. За каждый правильный ответ начисляется 20 баллов.

Правила подсчета результатов

За каждый правильный ответ участнику начисляются призовые баллы. При достижении определенных результатов участники конкурса получают сертификат одной из трех категорий:

«Специалист в УСН»,

«Эксперт в УСН»,

«Профессионал в УСН» (высшая категория).

Все участники конкурса получат диплом от организаторов – Минфина России и журнала «Упрощёнка», подтверждающий их квалификацию в области УСН. Диплом – неоспоримое преимущество, подтверждающее знание и опыт его владельца в применении упрощенной системы налогообложения. Знак качества, который, несомненно, повысит конкурентное преимущество его обладателя при приеме на работу.

Участие в конкурсе возможно в онлайн-режиме на сайте www.26-2.ru.

Упрощенка — Актион Реклама

Сайт журнала Упрощенка

<b>Статистика</b><br>
Просмотры страниц — 8 792 100 в месяц, уникальные пользователи — 3 476 500 в месяц.<br>
<br>
<b>Источники трафика</b><br>
Прямой трафик, ежедневные, социальные сети, e-mail рассылки, органика.<br>
<br>
<b>Виды рекламы</b><br>
Баннерная реклама, текстовая реклама, реклама в e-mail рассылках.


Файлы для скачивания

Оставьте контакты и мы подберем вам оптимальные варианты размещения

Пакет [email protected] Интернет

Одновременное размещение рекламы на 25 ресурсах холдинга. Максимальных охват уникальной аудитории: генеральные директора, финансовые директора, главбухи, директора по персоналу и др.


Файлы для скачивания

Пакет Женский Интернет

14 ресурсов с женской аудиторией.


Файлы для скачивания

Пакет Бухгалтер Интернет

6 уникальных ресурсов для бухгалтеров


Файлы для скачивания

Пакет Top-Women Интернет

Одновременное размещение рекламы на самых известных сайтах для главных бухгалтеров, бухгалтеров различного уровня, работников кадровых служб и руководителей HR-подразделений


Файлы для скачивания

Пакет Бизнес Интернет

5 уникальных ресурсов с бизнес аудиторией. Максимальный охват владельцев бизнеса и людей принимающих решения в компании.


Файлы для скачивания

Пакет Женский Премиум Интернет

7 ресурсов с женской аудиторией.


Файлы для скачивания

Пакет Бизнес + Интернет

10 уникальных ресурсов с бизнес аудиторией. Максимальный охват владельцев бизнеса и людей принимающих решения в компании.


Файлы для скачивания

Пакет Top-Women печать

Одновременное размещение рекламы в самых известных изданиях для главных бухгалтеров , бухгалтеров различного уровня и руководителей HR-служб.


Файлы для скачивания

Оставьте контакты и мы подберем вам оптимальные варианты размещения

Образец заполнения формы 26.2.1 для ИП – заявление 26 2 1

Срок подачи уведомления

Статья 346.13 HК РФ позволяет перейти на упрощённую систему вновь созданной организации и зарегистрированному индивидуальному предпринимателю в срок 30 дней после постановки на налоговый учёт. При этом заявитель признается применяющим упрощёнку с даты регистрации ИП или ООО.

Оговорка сделана специально, чтобы не вынуждать налогоплательщиков несколько дней до перехода на УСН отчитываться по общей системе налогообложения. Например, предприниматель зарегистрировался 25 апреля 2019 года, а сообщил о своем выборе только 10 мая. В 30-дневный срок он уложился, поэтому считается применяющим упрощённую систему налогообложения с 25.04.19. Отчитываться за третий квартал в рамках ОСНО ему не требуется.

Для расчёта авансовых платежей за квартал, воспользуйтесь нашим бесплатным калькулятором УСН.

Подавать заявление о переходе на УСН можно сразу вместе с другими документами на государственную регистрацию, однако если налоговые инспекции (регистрирующая и та, где налогоплательщик будет поставлен на учёт) разные, то в приёмке могут отказать.

Просто будьте готовы к такой ситуации, отказ в принятии — не произвол налоговиков, а нечёткое требование Налогового кодекса. В таком случае вы просто должны подать форму 26.2-1 в ту инспекцию, куда вас поставили на учёт: по прописке ИП или юридическому адресу организации. Главное – успеть сделать это в 30-дневный срок после регистрации бизнеса.

Если вы сразу не сообщите в ИФНС о переходе, то возможность появится только со следующего года. Так, если ИП из нашего примера, зарегистрированный 25.04.19, не сообщит об этом, то будет работать на общей системе до конца 2019 года. А с 2020 года он снова получит право перехода на льготный режим, но сообщить об этом надо не позднее 31 декабря 2019 года.

Таким образом, уведомить налоговые органы о своем выборе можно либо в течение 30 дней со дня регистрации ИП/ООО или до 31 декабря, чтобы перейти на УСН со нового года. Исключение сделано только для работающих на ЕНВД, они вправе перейти на упрощёнку среди года, но если снялись с учета как плательщики вменённого налога.

Для удобства ведения бизнеса, оплаты налогов и страховых взносов советуем открыть расчётный счёт в банке. Тем более сейчас многие банки предлагают выгодные условия по открытию и ведению расчётного счёта.

В какую ИФНС сообщать о переходе

Если следовать букве закона, то заявление о переходе на упрощенную систему налогообложения с нового года надо подать в ту инспекцию, где действующий бизнесмен уже поставлен на налоговый учёт. Указание на это есть в п. 1 статьи 346.13 НК РФ.

А вот в отношении того, можно ли подавать уведомление в ту же ИФНС, куда подаются документы на госрегистрацию, точно не сказано. Дело в том, что в крупных городах и некоторых регионах созданы специальные регистрирующие инспекции. Так, в Москве это 46-ая инспекция, в Питере — 15-ая. То есть, документы на регистрацию подают только в них, а на учёт ставят в ИФНС по прописке ИП или юрадресу ООО.

На практике налоговики (та же самая 46-ая московская ИФНС) без проблем принимают заявление на УСН при подаче документов на регистрацию, но кое-где, как мы уже говорили, требуют обращаться по месту налогового учёта. В вашем конкретном случае вполне может оказаться, что инспекция, куда вы подаёте документы и которая ставит вас на налоговый учёт, будет одной и той же. Тогда и вопрос выбора ИФНС просто не возникает. Узнать код инспекции можно на сайте налоговой службы.

Как заполнить уведомление

Бланк одностраничный, заполнить его просто, но определённые моменты надо учитывать:

  • Если подаётся заявление на УСН при регистрации ИП или организации, то поля ИНН и КПП не заполняют.
  • Подписывает форму 26.2-1 лично предприниматель или руководитель ООО. Все остальные лица, в том числе учредитель, могут подписывать заявление только по доверенности, указывая её реквизиты. Из опыта – налоговики принимают подпись учредителя и без доверенности, но будьте готовы к спорам, лучше всё-таки, чтобы подписывал руководитель.
  • Перед тем, как выбрать объект налогообложения: «Доходы» или «Доходы минус расходы», советуем получить бесплатную консультацию или самостоятельно изучить разницу между этими режимами. Поменять объект налогообложения можно будет только с нового года.

Приводим образец сообщения о переходе на УСН при регистрации ООО, для ИП он заполняется аналогично.

1.Первые ячейки (ИНН и КПП) заполняются уже действующими организациями, которые меняют налоговый режим. Только что созданные компании и ИП проставляют здесь прочерки.

2.Далее указываете код налогового органа и признак налогоплательщика:

  • 1 – при подаче формы 26.2-1 вместе с документами на регистрацию;
  • 2 – если сообщаете о выборе упрощёнки в первые 30 дней с даты постановки на учёт или снятии с учёта по ЕНВД;
  • 3 – при переходе работающих бизнесменов с других режимов.

3.Вписываете полное имя индивидуального предпринимателя или название организации.

4.Укажите код даты перехода на УСН:

  • 1 – при выборе упрощённой системы с начала следующего года;
  • 2 – с даты постановки новой компании или ИП на учет;
  • 3 – с начала месяца в году при снятии с учета плательщика ЕНВД.

5.Выберите код объекта налогообложения:

  • 1 – для «Доходы»;
  • 2 – для «Доходы минус расходы».

Ниже вписываете год подачи уведомления. Поля с суммами доходов за предыдущие 9 месяцев и стоимость ОС заполняют только работающие организации.

6.В левом нижнем поле внесите данные заявителя, выбрав его признак:

  • 1 – лично предприниматель или директор ООО;
  • 2 – представитель, подающий по доверенности.

Во втором случае надо вписать название и реквизиты доверенности. Кроме того, указывается полное имя директора или представителя, ФИО предпринимателя в левом нижнем поле не дублируется.

7.Остается только внести номер телефона заявителя и дату подачи. Остальные свободные ячейки заполняются прочерками.

Чтобы упростить подготовку уведомления, можно заполнять его в нашем сервисе. Просто следуйте подсказкам системы, и вы получите пример документа с вашими данными, при необходимости отредактируйте его. Вам останется только распечатать весь пакет документов и подать в ИФНС.

Создать документы

Обычно хватает двух экземпляров уведомления, один остается у инспектора, второй отдают с отметкой о принятии, его надо хранить у себя в качестве подтверждения выбора УСН. На практике некоторые наши пользователи сообщают, что у них запрашивают три экземпляра, поэтому советуем иметь при себе дополнительную копию уведомления.

Как убедиться в том, что вас действительно поставили на учёт в качестве плательщика упрощённой системы? В письме ФНС от 02.11.2012 № ММВ-7-3/829 приводится форма информационного письма (№ 26.2-7), которое налоговая инспекция обязана направить налогоплательщику по его запросу. Письмо подтверждает, что бизнесмен подавал уведомление о переходе на УСН. Особой нужды в подтверждении нет, достаточно второго экземпляра заявления с отметкой инспектора, но некоторые контрагенты при заключении сделок могут запросить такой официальный ответ.

Отзывы о 26-2.ru — Журнал электронный «Упрощенка»

Фотогалерея

Интересно предпринимателям на УСН

26.08.2018Достоинства:актуальная информация, специализированный журнал УСННедостатки:платныйЭлектронный журнал «Упрощенка» встретила в новостной ленте, заинтересовал заголовок по актуальной теме сейчас — применение онлайн-касс. В печатном виде журнал всегда выписывали для главбуха на прежнем месте работы, для меня приходил другой журнал этого издательтва…Читать весь отзывОтзыв рекомендуют:160

Развод при подписке… И очень агрессивные продажи.

17.04.2019Достоинства:не нашел…Недостатки:очень агрессивные продажи вводят в заблуждение при продаже отказываются возвращать деньги за ненужную услугуТем кто задумывается сотрудничать с издательским домом Актион-МЦФЭР, узнавайте и переспрашивайте детали! В ходе поиска информации касаемо работы своего ИП, я наткнулся на начало статьи в электронном журнале. Дальше читать предлагали получив демо доступ, оставив…Читать весь отзывОтзыв рекомендуют:8

Обман

05.12.2019Достоинства:ЭлектронныйНедостатки:ОбманЖурнал не эффективно даёт пояснения, на нужный вопрос ответа не найдёшь, а как они заманивают, чтобы на них подписались так это полный обман обещают много, но ничего неЧитать весь отзывОтзыв рекомендуют:2

Грузите апельсины бочками…

12.03.2020Достоинства:К материалам журнала вопросов нет.Недостатки:Лохотрон! не выполнены обещания перед подписчиками. Тёрли по ушам почти полгода. Причём на прямой вопрос о реальности анонсируемого подарка — следовали только уверения в почтении.Уважаемые граждане! Представляю Вам изумительную «тёрку по ушам» от организаторов подписки на «Упрощенку». В октябре 2019 нежданно-негаданно объявили: Вы подписывайтесь, а мы Вам ПЫЛЕСОС! Да не абы какой, а самоползующий! Ждите, мол и к Новому…Читать весь отзывОтзыв рекомендуют:1

Отзывы на аналоги:

Авиакомпания Atlas Jet AirlinesСанаторий «Анапа» (Россия, Анапа)Чайник электрический Energy E-262Электрочайник Unit UEK-262Электрическая звуковая зубная щетка CS Medica SonicPulsar CS-262Независимый электрический духовой шкаф Bosch HBA 23B262EИспользуемые источники:

  • https://otzovik.com/reviews/26-2_ru-zhurnal_elektronniy_uproschenka/

1C Франчайзи — ИНТЕХ

купить, программ, 1С, 1, С, в, Егорьевске, Московской, бухгалтерия, предприятие, продукт, 2, 3, 8, 7, 10, 11, 5, 0, торговля, склад, зарплата, кадры, управление, персонал, настроить, обучение, на, курсы, компьютерный, центр, ООО, ИНТЕХ, учет, производство, ERP, УПП, УТ, ЗУП, упрощенка,  документооборот, розница, небольшая, фирма, деньги, скачать, сопровождение, внедрить, обновить, обучить, франчайзи, организация, поддержка, сертифицированный, аттестованный, компьютер, Егорьевск, Москва, область, Воскресенск, Шатура, Ликино, Коломна, Рошаль, Бронницы, Шувое, Куровское, Луховицы, ЭЦП, отчетность, ИТС, электронный, архив, автоматизация, оперативный, техподдержка, телефон, Интернет, аренда, автосервис, магазин, бухфон, горячая, линия, битрикс, версия, лицензия, линк, релиз, сайт, фреш, ЦСО, ЭДО, яндекс, карта. купить, программ, 1С, 1, С, в, Егорьевске, Московской, бухгалтерия, предприятие, продукт, 2, 3, 8, 7, 10, 11, 5, 0, торговля, склад, зарплата, кадры, управление, персонал, настроить, обучение, на, курсы, компьютерный, центр, ООО, ИНТЕХ, учет, производство, ERP, УПП, УТ, ЗУП, упрощенка,  документооборот, розница, небольшая, фирма, деньги, скачать, сопровождение, внедрить, обновить, обучить, франчайзи, организация, поддержка, сертифицированный, аттестованный, компьютер, Егорьевск, Москва, область, Воскресенск, Шатура, Ликино, Коломна, Рошаль, Бронницы, Шувое, Куровское, Луховицы, ЭЦП, отчетность, ИТС, электронный, архив, автоматизация, оперативный, техподдержка, телефон, Интернет, аренда, автосервис, магазин, бухфон, горячая, линия, битрикс, версия, лицензия, линк, релиз, сайт, фреш, ЦСО, ЭДО, яндекс, карта,

Обновление 1С, управленческий учет, бухгалтерский учет

Наша компания также занимается разработкой собственных программных продуктов на платформе «1С:Предприятие 8». 

В нашей компании работают сертифицированные фирмой «1С» специалисты, которые постоянно совершенствуют свои знания и навыки. Они помогут качественно и оперативно решить задачи по автоматизации управления и учета на вашем предприятии.
Наша компания опирается в своей работе на знание и повседневное применение стандартов качества, проектных методов в управлении, процессного подхода в организации нашей деятельности.
Компания хорошо организована, в ней четко распределены обязанности, процедуры, соблюдается технология работы, имеются оперативные инструкции, документированные и известные всему персоналу, существуют отработанные процедуры контроля выполняемых работ и, конечно, профессиональный и хорошо обученный персонал, способный качественно выполнять свою работу. 

Электрохимическая реакция выделения водорода, эффективно катализируемая сочетанием Ru – N в богатых дефектами нанолистах Ru / g-C3N4

Низкая собственная активность Ru серьезно ограничивает его практическое применение в производстве водорода (HER) через устойчивое расщепление воды . Здесь мы сообщаем о прочных и надежных катализаторах с высоким содержанием дефектов Ru / g-C 3 N 4 нанолистовых катализаторов для электрохимического генерирования водорода как в щелочных, так и в кислых электролитах.Катализатор может быть изготовлен простым пиролизом лиофилизированного комплекса Ru 3+ –меламин, и эффективное сочетание Ru – N было продемонстрировано с помощью некоторых спектроскопических исследований. Теоретический анализ выявил эффективную орбитальную гибридизацию Ru и N для образования связи Ru – N в системе и, таким образом, благоприятные свойства переноса электронов и промежуточной адсорбции. В результате предложенные катализаторы показали небольшие перенапряжения 27 мВ и 34 мВ в кислотном и щелочном электролитах, соответственно, для достижения 10 мА · см -2 при загрузке на инертный стеклоуглеродный электрод, который занял одно из первых мест. Катализаторы на основе Ru.Он также продемонстрировал высокую каталитическую стабильность, включая 10 000 циклов CV при исследовании динамической стабильности и 20 часов работы в установившемся режиме. Многократное увеличение собственной активности по сравнению с Ru / C было указано значениями удельной активности, массовой активности и частоты оборота; В этой каталитической системе также наблюдались быстрая передача заряда, более быстрая кинетика и повышенное воздействие на активные центры благодаря эффективному сочетанию Ru – N. В данной работе описывается простой подход к изготовлению структур сопряжения Ru – N и его вклад в высокие характеристики HER, что способствует разработке высокопроизводительных катализаторов на основе Ru.

У вас есть доступ к этой статье

Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуй еще раз?

Федеральных правил гражданского судопроизводства | Федеральные правила гражданского судопроизводства | Закон США

Историческая записка

Первоначальный регламент гражданского судопроизводства для окружных судов был принят постановлением Верховного суда 12 декабря.20 декабря 1937 г., передано в Конгресс Генеральным прокурором 3 января 1938 г. и вступило в силу 16 сентября 1938 г.

В Правила внесены изменения 28 декабря 1939 г., эфф. 3 апреля 1941 г .; 27 декабря 1946 г., эфф. 19 марта 1948 г .; 29 декабря 1948 г., эфф. 20 октября 1949 г .; 30 апреля 1951 г., эфф. 1 августа 1951 г .; 17 апреля 1961 г., эфф. 19 июля 1961 г .; 21 января 1963 г., эфф. 1 июля 1963 г .; 28 февраля 1966 г., эфф. 1 июля 1966 г .; 4 декабря 1967 г., эфф. 1 июля 1968 г .; 30 марта 1970 г., эфф. 1 июля 1970 г .; 1 марта 1971 г., эфф. 1 июля 1971 г .; Ноябрь20, 1972 г. и 18 декабря 1972 г., эфф. 1 июля 1975 г .; 29 апреля 1980 г., эфф. 1 августа 1980 г .; 21 октября 1980 г., Pub. L. 96–481, раздел II, §205 (a), (b), 94 Stat. 2330; 12 января 1983 г., Pub. L. 97–462, §§2–4, 96 Stat. 2527–2530, эфф. 26 февраля 1983 г .; 28 апреля 1983 г., эфф. 1 августа 1983 г .; 29 апреля 1985 г., эфф. 1 августа 1985 г .; 2 марта 1987 г., эфф. 1 августа 1987 г .; 25 апреля 1988 г., эфф. 1 августа 1988 г .; 18 ноября 1988 г., Pub. L. 100–690, раздел VII, §§7047 (b), 7049, 7050, 102 Stat. 4401; 30 апреля 1991 г., эфф. 1 декабря 1991 г .; 9 декабря 1991 г., Pub. Л.102–198, §11, 105 Стат. 1626; 22 апреля 1993 г., эфф. 1 декабря 1993 г ​​.; 27 апреля 1995 г., эфф. 1 декабря 1995 г .; 23 апреля 1996 г., эфф. 1 декабря 1996 г .; 11 апреля 1997 г., эфф. 1 декабря 1997 г .; 24 апреля 1998 г., эфф. 1 декабря 1998 г .; 26 апреля 1999 г., эфф. 1 декабря 1999 г .; 17 апреля 2000 г., эфф. 1 декабря 2000 г .; 23 апреля 2001 г., эфф. 1 декабря 2001 г .; 29 апреля 2002 г., эфф. 1 декабря 2002 г .; 27 марта 2003 г., эфф. 1 декабря 2003 г .; 25 апреля 2005 г., эфф. 1 декабря 2005 г .; 12 апреля 2006 г., эфф. 1 декабря 2006 г .; 30 апреля 2007 г., эфф. 1 декабря 2007 г .; 23 апреля 2008 г., эфф. 1 декабря 2008 г .; Мар.26, 2009, эфф. 1 декабря 2009 г .; 28 апреля 2010 г., эфф. 1 декабря 2010 г .; Апрель 2013, эфф. 1 декабря 2013 г .; 25 апреля 2014 г., эфф. 1 декабря 2014 г .; 29 апреля 2015 г., эфф. 1 декабря 2015 г .; 28 апреля 2016 г., эфф. 01 декабря 2016 г.

Ссылки на правила капитала

Федеральные правила гражданского судопроизводства заменяют Правила справедливости, поскольку в целом они охватывают область, которая сейчас регулируется Правилами справедливости и Законом о соответствии (бывший раздел 724 настоящего раздела).

В этой таблице показаны Правила справедливости, ссылки на которые сделаны в примечаниях к Федеральным правилам гражданского судопроизводства.

Правила капитала Федеральные правила гражданского судопроизводства
1 77
2 77
3 79
4 77
5 77
6 78
7 4, 70
8 6, 70
9 70
10 18, 54
11 71
12 3, 4, 5, 12, 55
13 4
14 4
15 4, 45
16 6, 55
17 55
18 7, 8
19 1, 15, 61
20 12
21 11, 12
22 1
23 1, 39
24 11
25 8, 9, 10, 19
26 18, 20, 82
27 23
28 15
29 7, 12, 42, 55
30 8, 13, 82
31 7, 8, 12, 55
32 15
33 7, 12
34 15
35 15
36 11
37 17, 19, 20, 24
38 23
39 19
40 20
41 17
42 19, 20
43 12, 21
44 12, 21
45 25
46 43, 61
47 26
48 43
49 53
50 30, 80
51 30, 53
52 45, 53
53 53
54 26
55 30
56 40
57 40
58 26, 33, 34, 36
59 53
60 53
61 53
611/2 53
62 53
63 53
64 26
65 53
66 53
67 53
68 53
69 59
70 17
701/2 52
71 54
72 60, 61
73 65
74 62
75 75
76 75
77 76
78 43
79 83
80 6
81 86

Версия китайского союза (упрощенная) (CUVS) — Информация о версии

29394959697989

01102103104105106107108101111211311411511611711811

2112212312412512612712812

3113213313413513613713813

41142143144145146147148149150
раскрывающийся списокclose 創 世 記 50 12345678

121314151617181

2223242526272829303132333435363738394041424344454647484950
раскрывающийся списокзакрыть 出 埃 及 記 40 12345678

121314151617181

22232425262728293031323334353637383940
раскрывающийся списокclose 利 未 記 27 12345678

121314151617181

222324252627
раскрывающийся списокзакрыть 民 數 記 36 12345678

121314151617181

222324252627282930313233343536
раскрывающийся списокclose 申 命 記 34 12345678

121314151617181

22232425262728293031323334
раскрывающийся списокзакрыть 約 書 亞 記 24 12345678

121314151617181

222324
раскрывающийся списокclose 士 師 記 21 12345678

121314151617181

раскрывающийся списокзакрыть 路 得 記 4 1234
раскрывающийся списокзакрыть 撒 母 耳 記 上 31 12345678

121314151617181

22232425262728293031
раскрывающийся списокзакрыть 撒 母 耳 記 下 24 12345678

121314151617181

222324
раскрывающийся списокзакрыть 列 王 紀 上 22 12345678

121314151617181

22
раскрывающийся списокclose 列 王 紀 下 25 12345678

121314151617181

22232425
раскрывающийся списокзакрыть 歷 代 志 上 29 12345678

121314151617181

2223242526272829
раскрывающийся списокзакрыть 歷 代 志 下 36 12345678

121314151617181

222324252627282930313233343536
раскрывающийся списокзакрыть 以 斯 拉 記 10 12345678910
раскрывающийся списокclose 尼 希 米 記 13 12345678

1213
раскрывающийся списокзакрыть 以 斯 帖 記 10 12345678910
раскрывающийся списокзакрыть 約 伯 記 42 12345678

121314151617181

222324252627282930313233343536373839404142
раскрывающийся списокзакрыть 詩 篇 150 12345678

121314151617181

2223242526272829303132333435363738394041424344454647484950515253545556575859606162636465666768697071727374757677787980818283848586878889
раскрывающийся списокclose 箴 言 31 12345678

121314151617181

22232425262728293031
раскрывающийся списокзакрыть 傳 道 書 12 12345678

12
раскрывающийся списокзакрыть 雅 歌 8 12345678
раскрывающийся списокзакрыть 以 賽 亞 書 66 12345678

121314151617181

222324252627282930313233343536373839404142434445464748495051525354555657585960616263646566
раскрывающийся списокзакрыть 耶 利 米 書 52 12345678

121314151617181

22232425262728293031323334353637383940414243444546474849505152
раскрывающийся списокзакрыть 耶 利 米 哀 歌 5 12345
раскрывающийся списокзакрыть 以 西 結 書 48 12345678

121314151617181

222324252627282930313233343536373839404142434445464748
раскрывающийся списокзакрыть 但 以 理 書 12 12345678

12
раскрывающийся списокзакрыть 何 西 阿 書 14 12345678

121314
раскрывающийся списокзакрыть 約 珥 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 阿 摩 司 書 9 123456789
раскрывающийся списокзакрыть 俄 巴 底 亞 書 1 1
раскрывающийся списокзакрыть 約 拿 書 4 1234
раскрывающийся списокзакрыть 彌 迦 書 7 1234567
раскрывающийся списокзакрыть 那 鴻 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 哈 巴 谷 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 西 番 雅 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 哈 該 書 2 12
раскрывающийся списокзакрыть 撒 迦 利 亞 14 12345678

121314
раскрывающийся списокзакрыть 瑪 拉 基 書 4 1234
раскрывающийся списокclose 馬 太 福 音 28 12345678

121314151617181

22232425262728
раскрывающийся списокзакрыть 馬 可 福 音 16 12345678

1213141516
раскрывающийся списокзакрыть 路 加 福 音 24 12345678

121314151617181

222324
раскрывающийся списокзакрыть 約 翰 福 音 21 12345678

121314151617181

раскрывающийся списокзакрыть 使 徒 行 傳 28 12345678

121314151617181

22232425262728
раскрывающийся списокзакрыть 羅 馬 書 16 12345678

1213141516
раскрывающийся списокзакрыть 歌 林 多 前 書 16 12345678

1213141516
раскрывающийся списокзакрыть 歌 林 多 後 書 13 12345678

1213
раскрывающийся списокзакрыть 加 拉 太 書 6 123456
раскрывающийся списокзакрыть 以 弗 所 書 6 123456
раскрывающийся списокзакрыть 腓 立 比 書 4 1234
раскрывающийся списокзакрыть 歌 羅 西 書 4 1234
раскрывающийся списокзакрыть 帖 撒 羅 尼 迦 前 書 5 12345
раскрывающийся списокзакрыть 帖 撒 羅 尼 迦 後 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 提 摩 太 前 書 6 123456
раскрывающийся списокзакрыть 提 摩 太 後 書 4 1234
раскрывающийся списокзакрыть 提 多 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 腓 利 門 書 1 1
раскрывающийся списокзакрыть 希 伯 來 書 13 12345678

1213
раскрывающийся списокзакрыть 雅 各 書 5 12345
раскрывающийся списокзакрыть 彼 得 前 書 5 12345
раскрывающийся списокзакрыть 彼 得 後 書 3 123
раскрывающийся списокзакрыть 約 翰 一 書 5 12345
раскрывающийся списокзакрыть 約 翰 二 書 1 1
раскрывающийся списокзакрыть 約 翰 三 書 1 1
раскрывающийся списокclose 大 大 書 1 1
раскрывающийся списокзакрыть 启 示 录 22 12345678

121314151617181

22

Стоечный сервер PowerEdge R740 | Dell США

Intel Xeon Bronze 3204 1.9 ГБ, 6 ядер / 6 потоков, 9,6 ГТ / с, 8,25 МБ кэш-памяти, без турбо-режима, без HT (85 Вт), DDR4-2133

Intel® Xeon® Platinum 8280L 2,7 ГБ, 28 ядер / 56 потоков, 10,4 ГТ / с, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8280 2,7 ГБ, 28 ядер / 56 потоков, 10,4 ГТ / с, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8276L 2.2 ГБ, 28 ядер / 56 потоков, 10,4 ГТ / с, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8276 2,2 ГБ, 28 ядер / 56 потоков, 10,4 ГТ / с, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8270 2,7 Гбайт, 26 ядер / 52 потока, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8268 2.9G, 24C / 48T, 10,4GT / s, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8260Y 2,4 ГГц, 24 ядра / 48 потоков, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8260L 2,4 ГБ, 24 ядра / 48 потоков, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8260 2.4G, 24 ядра / 48 каналов, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Platinum 8253 2,2 ГБ, 16 ядер / 32 потока, 10,4 ГТ / с, 22 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6254, 3,1 ГБ, 18 ядер / 36 потоков, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (200 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6252 2.1 Гбит / с, 24 ядра / 48 каналов, 10,4 Гбит / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6248 2,5 ГБ, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 ГТ / с, 27,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6244 3,6 Гбайт, 8 ядер / 16 потоков, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6242 2.8 ГБ, 16 ядер / 32 потока, 10,4 ГТ / с, 22 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6240 2,6 ГБ, 18 ядер / 36 потоков, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6240Y 2,6 ГБ, 18 ядер / 36 потоков, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6230 2.1 Гбит / с, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 ГТ / с, 27,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6212U 2,4 ГБ, 24 ядра / 48 потоков, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6210U 2,5 ГБ, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 ГТ / с, 27,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 5222 3.8 ГБ, 4 ядра / 8 потоков, 10,4 ГБ / с, 16,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (105 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 5220, 2,2 ГГц, 18 ядер / 36 потоков, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2666

Intel Xeon Gold 5215L 2,5 ГБ, 10C / 20T, 10,4 ГТ / с, 13,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2666

Intel Xeon Gold 5215 2.5G, 10C / 20T, 10,4GT / s, 13,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Gold 5218, 2,3 ГБ, 16 ядер / 32 потока, 10,4 ГТ / с, 22 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Gold 5217 3,0 Гбит / с, 8 ядер / 16 потоков, 10,4 ГТ / с, 11 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (115 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Gold 6148 2.4G, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 ГТ / с, 27 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Gold 6136 3,0 Гбит / с, 12 ядер / 24 потока, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Gold 6130 2,1 ГБ, 16 ядер / 32 потока, 10,4 ГТ / с, 22 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Gold 5118 2.3G, 12 ядер / 24 потока, 10,4 ГТ / с, 16,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (105 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Silver 4216 2,1 Гбайт, 16 ядер / 32 потока, 9,6 ГТ / с, 22 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (100 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Silver 4215 2,5 ГБ, 8 ядер / 16 потоков, 9,6 ГТ / с, 11 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Silver 4214Y 2.2 ГБ, 12 ядер / 24 потока, 9,6 ГТ / с, 16,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Silver 4214 2.2G, 12C / 24T, 9.6GT / s, 16,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Silver 4210 2,2 ГБ, 10C / 20T, 9,6 ГТ / с, 13,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Silver 4208 2.1 Гбит / с, 8 ядер / 16 потоков, 9,6 ГТ / с, 11 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Gold 6238L 2,1 Гбайт, 22 ядра / 44 потока, 10,4 Гбит / с, 30,25 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (140 Вт), 4,5 ТБ DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6246 3,3 Гбайт, 12 ядер / 24 потока, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6234 3.3G, 8 ядер / 16 потоков, 10,4 ГТ / с, 24,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (130 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6222V 1,8 ГБ, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 ГТ / с, 27,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (115 Вт), DDR4-2400

Intel Xeon Gold 6238 2,1 ГБ, 22C / 44T, 10,4 ГТ / с, 30,25 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (140 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6226 2.7G, 12C / 24T, 10,4GT / s, 19,25 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Gold 6230N 2.3G, 20C / 40T, 10,4GT / s, 27,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2933

Intel Xeon Platinum 8276L 2.2G, 28C / 56T, 10,4GT / s, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933, Optane DCPMM

Intel Xeon Gold 5215L 2.5G, 10C / 20T, 10,4GT / s, 13,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (85 Вт) DDR4-2666, Optane DCPMM

Intel Xeon Platinum 8280L 2,7 Гбайт, 28 ядер / 56 потоков, 10,4 ГТ / с, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933, Optane DCPMM

Intel Xeon Platinum 8260L 2,4 ГБ, 24 ядра / 48 потоков, 10,4 ГБ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933, Optane DCPMM

Intel Xeon Gold 6240L 2.6G, 18C / 36T, 10,4GT / s, 24,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт) DDR4-2933, Optane DCPMM

Intel® Xeon® Gold 6258R 2,7 ГБ, 28 ядер / 56 потоков, 10,4 ГТ / с, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6242R, 3,1 Гбайт, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6208U 2.9G, 16C / 32T, 10,4GT / s, 22 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6246R 3,4 Гбайт, 16 ядер / 32 потока, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6240R 2,4 ГБ, 24 ядра / 48 потоков, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6238R 2.2G, 28C / 56T, 10,4GT / s, 38,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (165 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6230R 2,1 ГБ, 26 ядер / 52 потока, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 6226R 2,9 ГБ, 16 ядер / 32 потока, 10,4 ГТ / с, 22 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2933

Intel® Xeon® Gold 5218R 2.1 Гбит / с, 20 ядер / 40 потоков, 10,4 Гбит / с, 27,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (125 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Silver 4215R, 3,2 Гбайт, 8 ядер / 16 потоков, 9,6 ГТ / с, 11 МБ кэш-памяти, в режиме Turbo, HT (130 Вт), DDR4-2400

Intel® Xeon® Gold 5220R 2.2G, 24 ядра / 48 потоков, 10,4 ГТ / с, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (150 Вт), DDR4-2666

Intel® Xeon® Silver 4214R 2.4G, 12C / 24T, 9,6 ГТ / с, 16,5 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (100 Вт), DDR4-2400

Intel® Xeon® Silver 4210R 2,4 ГБ, 10 ядер / 20 потоков, 9,6 ГТ / с, 13,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (100 Вт), DDR4-2400

Intel® Xeon® Bronze 3206R 1,9 ГБ, 8 ядер / 8 потоков, 9,6 ГТ / с, 11 МБ кэш-памяти, без Turbo, без HT (85 Вт), DDR4-2400

Intel® Xeon® Gold 6248R 3.0G, 24C / 48T, 10,4GT / s, 35,75 МБ кэш-памяти, Turbo, HT (205 Вт), DDR4-2933

Конгресс по микроскопии 2021 | Thermo Fisher Scientific

Автоматизированный рабочий процесс с частицами (APW) на Talos (S) TEM

Понедельник, 23 августа, 13: 45–14: 00. CEST
Stream 1 Материаловедение

Узнайте, как гораздо быстрее получить более точную статистику по наночастицам или осадкам с помощью уникального пакета APW, который обеспечивает полностью автоматизированный автоматический запуск от сбора данных до обработки.Это также значительно улучшает повторяемость, поскольку отсутствует предвзятость оператора. Использование этого пакета позволяет значительно быстрее оптимизировать ваш продукт.


Автоматизация для получения больших объемов точных и точных данных S / TEM в полупроводниковой промышленности

Понедельник, 23 августа, 17: 30–17: 45. CEST
Stream 1 Материаловедение

Согласованность, надежность и целостность можно повысить с помощью автоматизации. На этом заседании представлены расширенные возможности автоматизации ТЕМ Thermo Scientific Metrios (S) для анализа полупроводников.


Познакомьтесь со Spectra Ultra (S) TEM и узнайте, как анализировать самый широкий спектр материалов в атомном масштабе

Вторник, 24 августа, 13: 45–14: 00. CEST
Stream 1 Материаловедение

Присоединяйтесь к презентации продукции Thermo Scientific Spectra Ultra (S) TEM, чтобы узнать о платформе S / TEM с самым высоким разрешением для определения характеристик самого широкого диапазона материалов. Spectra Ultra (S) TEM основан на и без того высокопроизводительном TEM Spectra 300 (S) с новой технологией детектора EDX и быстрым переключением ускоряющего напряжения (30–300 кВ) для размещения более сложных и чувствительных к пучку образцов.


Helios 5 Laser PFIB: Встречайте новейшую систему TriBeam для измерения характеристик в миллиметровом масштабе с разрешением в нм

Среда, 25 августа, 13: 45–14: 00. CEST
Stream 1 Наука о материалах

Присоединяйтесь к презентации продукта Thermo Scientific Helios 5 Laser PFIB, чтобы узнать о нашей последней системе TriBeam. На этом занятии мы покажем вам, как Helios 5 Laser PFIB позволяет:

  • Быстрая характеризация в миллиметровом масштабе с разрешением в нм с использованием полностью интегрированного фемтосекундного лазера
  • Оптимизированное фрезерование широкого спектра материалов благодаря возможности быстрого переключения ионов (Xe / Ar / N / O)
  • Автоматизировано, in situ , Подготовка образцов ПЭМ без Ga с использованием программного обеспечения Thermo Scientific AutoTEM 5

Знакомьтесь с настольным СЭМ Phenom Pharos G2: интуитивно понятные доказательства для вашего исследования

Среда, 25 августа, 6–6: 15 п.м. CEST
Stream 1 Материаловедение

Настольный FEG-SEM Thermo Scientific Phenom Pharos G2 позволяет использовать автоэмиссионный SEM для вашего стола. Присоединяйтесь к этой сессии Знакомьтесь с продуктом, чтобы узнать, как он делает производительность FEG доступной для широкого круга пользователей благодаря привлекательному форм-фактору и необходимому короткому обучению.


Встречайте Apreo 2 SEM: непревзойденная универсальность на основе технологии ChemiSEM

Четверг, 26 августа, 13: 45–14: 00. CEST
Stream 1 Материаловедение

Новый SEM Thermo Scientific Apreo 2 SEM расширяет доступ к высокопроизводительной визуализации и аналитике для всех уровней знаний в области микроскопии.Благодаря технологии Thermo Scientific ChemiSEM, уникальной возможности визуализации элементов в реальном времени, информация о составе всегда доступна через интуитивно понятный интерфейс. Присоединяйтесь к этой сессии Знакомьтесь с продуктом и узнайте больше об этом сканирующем электронном микроскопе для универсальной высокопроизводительной визуализации и анализа материалов.

Администрация Ньюсома дополняет систему доставки вакцины; Объявляет о создании общегосударственной сети доставки вакцины для упрощения и стандартизации процесса вакцинации с акцентом на справедливость

Для немедленного выпуска
26 января 2021 г.

Контактное лицо:
Эми[email protected]
[email protected]

Новая система будет сотрудничать с округами в области санитарного просвещения и охвата труднодоступных сообществ

Сторонний администратор появится на борту, чтобы упростить, улучшить и ускорить администрирование вакцины, с возможностью масштабирования

Жители Калифорнии могут перейти на MyTurn.Ca.Gov, чтобы подписаться на Уведомление сейчас, запуск инструмента планирования Февраль по всему штату

Sacramento — На основе уроков, полученных в ходе 10-дневного конкурса вакцины, администрация Ньюсома подробно описала серию изменений в системе доставки вакцины, чтобы сосредоточить внимание каждого сектора системы здравоохранения на своих основных задачах и ускорить введение вакцины.

Распространение вакцины и операции будут возглавляться Иоландой Ричардсон, секретарем Управления государственных операций, в консультации и партнерстве с доктором Марком Гали, министром здравоохранения и социальных служб, и Департаментом общественного здравоохранения Калифорнии. Хотя количество вакцин остается крайне ограниченным, цель состоит в том, чтобы создать систему для справедливого и эффективного введения вакцин при увеличении предложения.

«Руководители органов здравоохранения наших штатов и округов сделали важную основу для реализации плана вакцинации в Калифорнии, и мы благодарны им и будем продолжать сотрудничать с ними», — сказал губернатор Ньюсом.«Мы узнали, что для ускорения темпов нам необходимо увеличить масштабы наших усилий, чтобы поставки вакцины поступали в продажу так же быстро, как они поступают в штат. Это сотрудничество между секретарями Гали и Ричардсоном продолжает наш подход к лидерству в области общественного здравоохранения и добавляет опыт секретарю Ричардсон в операциях и системе оказания медицинской помощи, которая будет иметь решающее значение для реализации этих улучшений, чтобы обеспечить безопасную и быструю вакцинацию всех калифорнийцев с соблюдением принципа справедливости. Полярная звезда.”

В частности, штат внесет три изменения на основе уроков, извлеченных из 10-дневного конкурса вакцины.

Упрощение права на участие: В целях упрощения права на участие с середины февраля штат вводит общегосударственный стандарт, в соответствии с которым работники здравоохранения, лица старше 65 лет, работники сферы образования и ухода за детьми, службы экстренной помощи, а также работники пищевой промышленности и сельского хозяйства будут иметь право записываться на прием. получить вакцину в ожидании доступности вакцины.Это группы, определенные на этапе 1B, уровень 1.

Будущие группы будут иметь право на участие в зависимости от возраста. Этот стандарт штата будет действовать согласованно во всех 58 округах. Это позволит штату расширить возможности, а также гарантировать, что вакцина будет доставлена ​​непропорционально сильно пострадавшим общинам.

Стандартизация информации и данных: Используя инновационные и технологические активы Калифорнии, штат сегодня официально запускает My Turn — новую систему, позволяющую калифорнийцам узнать, когда они имеют право на вакцинацию, место для записи на прием, когда они соответствуют критериям, и механизм чтобы легко отслеживать данные о вакцинации.Через My Turn люди могут подписаться на уведомление, когда они имеют право назначить встречу, и назначить ее, когда придет их очередь. Моя очередь также поможет отследить тех, кто еще не получил вторую дозу вакцины и нуждается в дополнительной помощи.

Технология

от калифорнийских компаний Salesforce и Skedulo — фундамент My Turn. Пройдя пилотное тестирование в округах Лос-Анджелес и Сан-Диего, люди могут посетить https://myturn.ca.gov, чтобы сразу же зарегистрироваться для получения уведомления.Планирование встреч за пределами пилотных округов, как ожидается, будет доступно где-то в феврале.

Система My Turn также автоматически передает информацию о вакцинации в системы данных штата. Поставщики должны будут вводить вакцины либо через систему расписания My Turn, либо через электронную медицинскую карту с автоматической подачей данных в систему штата. Это сократит запаздывание данных и предоставит нам информацию в реальном времени о том, как у нас дела на местном уровне и уровне штата.

Обращение к доступным поставкам путем оптимизации процесса вакцинации: Основываясь на недавних знаниях, команда штата по вакцинации будет опираться на работу округов и поставщиков медицинских услуг для координации доставки вакцины в масштабах штата, чтобы обеспечить безопасность, справедливость и максимально быструю доставку вакцины. вакцина.

Калифорния построит сеть администрации вакцины в масштабе штата, чтобы ускорить справедливую поставку текущих поставок имеющим на это право жителям Калифорнии. Государство через стороннего администратора (TPA) будет распределять вакцины напрямую поставщикам для максимальной эффективности распределения.Это также даст государству больше информации о том, что происходит на местах.

Ожидается, что сеть поставщиков вакцины будет включать в себя системы общественного здравоохранения, аптеки, системы здравоохранения, государственные больницы, общественные центры здоровья, аптеки, а также всплывающие и мобильные сайты с немедленным упором на предоставление услуг поставщикам с высокой пропускной способностью. Сеть поставщиков вакцины будет расширяться по мере роста предложения вакцины и изменения характеристик вакцины, с использованием стационарных и мобильных пунктов для удовлетворения потребностей отдельных сообществ.Местные системы общественного здравоохранения будут продолжать играть ключевую роль в качестве поставщиков вакцин и предоставлять свои уникальные идеи и знания для обеспечения того, чтобы сеть охватывала непропорционально сильно пострадавших калифорнийцев.

Новый подход по-прежнему будет ориентирован на акционерный капитал. Вакцины будут распределяться, чтобы обеспечить доступ к вакцинам в районах проживания малообеспеченных и цветных сообществ, а поставщики будут частично компенсированы тем, насколько хорошо они смогут охватить общины с недостаточным уровнем обеспеченности услугами. Данные в реальном времени позволят внести корректировки, если первоначальные целевые показатели капитала не достигнуты.

В то время как штат будет стимулировать более быстрое управление доступными поставками вакцин, общие поставки вакцины в Калифорнию будут по-прежнему определяться федеральным правительством.

Секретарь Ричардсон — эксперт по операциям с 25-летним опытом управления в частном и государственном секторе, в том числе на руководящей должности, когда она помогла запустить Covered California. Она также имеет обширный опыт работы с системой оказания медицинских услуг, работая в качестве главного операционного директора в San Francisco Health Plan, а также на руководящих должностях в Cal eConnect по обмену медицинской информацией и в компании Vision Service Plan по страхованию зрения.

Министр

Ричардсон будет тесно сотрудничать с министром здравоохранения и социальных служб Калифорнии доктором Марком Гали, который руководит службами здравоохранения штата, социальными службами, службами психического здоровья, службами алкоголя и наркотиков, пособиями по доходам и службами общественного здравоохранения.

###

Апоптоз в развитии и лечении рака | Канцерогенез

Аннотация

Наши соматические клетки рождаются в результате митоза, и почти все они умрут в результате апоптоза, физиологического процесса клеточного самоубийства.Рак может возникнуть, когда этот баланс нарушен, либо из-за увеличения пролиферации клеток, либо из-за уменьшения их гибели. Цель терапии рака — способствовать гибели раковых клеток, не нанося слишком большого ущерба нормальным клеткам. Наши знания о механизмах апоптоза расширили наше понимание того, как возникают и развиваются некоторые виды рака. Также было обнаружено, что существующие методы лечения рака могут работать двумя способами: за счет индукции апоптоза и за счет прямой токсичности. В некоторых случаях устойчивость к апоптозу может объяснить, почему методы лечения рака неэффективны.Новые методы лечения, разработанные для использования наших знаний об апоптотических механизмах, находятся в стадии разработки, чтобы способствовать апоптозу раковых клеток и ограничивать одновременную гибель нормальных клеток.

Введение

Апоптотические клетки уже давно наблюдаются при раке. Например, высокая скорость апоптоза, наблюдаемая при базальноклеточных карциномах кожи, объясняет, почему это относительно медленно растущие опухоли, несмотря на их высокую скорость митоза (1). Повышенный апоптоз наблюдался в облученных опухолях и опухолях, обработанных цитотоксинами, что означает, что методы лечения, которые увеличивают скорость апоптоза, могут использоваться для лечения рака (2).

Однако роль отказа апоптоза в возникновении рака была осознана намного позже. Это последовало за открытием, что ген bcl-2 , который часто транслоцируется в фолликулярной лимфоме, кодирует белок, ингибирующий гибель клеток (3). Как первый компонент апоптотического механизма, который должен быть идентифицирован, bcl-2 также помог в выяснении других частей апоптотического механизма.

Когда bcl-2 экспрессировалось в клетках в культуре ткани, это не только защищало их от апоптоза за счет удаления факторов роста, но и предотвращало апоптоз после лечения разнообразными лекарствами и токсинами, придавая клеткам множественную лекарственную устойчивость. фенотип (4, 5).Это предполагает, что гены, ингибирующие апоптоз, такие как bcl-2 , могут не только играть роль в развитии злокачественных новообразований, но также определять реакцию на терапию.

Однако само по себе ингибирование апоптоза не приводит к быстрой трансформации клеток или возникновению рака. Однако, когда ингибирование апоптоза, например, Bcl-2, сочетается с активацией обычного онкогена, стимулирующего рост, такого как c- myc , рак может развиваться очень быстро (6).

Механизмы апоптоза

Не всякая клеточная смерть является физиологической

Это аксиома, что все клетки погибнут, если процесс, необходимый для их дальнейшего выживания, будет заблокирован.Большинство клеток животных не только смертны, но и способны к самоубийству, что означает, что они несут в себе механизмы, физиологическая роль которых заключается в том, чтобы вызывать их собственную смерть. Один из таких физиологических процессов самоубийства клеток называется апоптозом или запрограммированной смертью клеток. Клетки, которые убивают себя в результате этого процесса, обычно имеют характерную морфологию.

Обычно апоптотические клетки сжимаются, их хроматин конденсируется по краям ядра и in vivo клетка поглощается другой клеткой.Биохимические маркеры апоптоза включают активацию протеаз, называемых каспазами, расщепление белков и ДНК и воздействие фосфатидилсерина на поверхность клетки. Хотя эти события полезны для идентификации клеток, подвергшихся апоптозу, важно отметить, что они могут происходить задолго до того, как клетка совершила смерть, и некоторые клетки, которые активировали программу гибели клеток и которым суждено умереть, могут не проявлять ни одного из эти изменения (7).

Хотя легко определить, мертва ли клетка, гораздо труднее определить, жива ли она.Хотя это применимо не ко всем типам клеток, золотым стандартом для определения того, умерла ли клетка, является потеря способности воспроизводиться для создания клона (8). Конечно, в случае раковых клеток это особенно важно.

Апоптоз — обычная реакция на стресс

Еще больше усложняет анализ гибели клеток тот факт, что апоптоз является распространенной реакцией на клеточный стресс (9). Клетки контролируют многие аспекты своей физиологии. Любое лекарство или агент, способные убить клетку, вызовет физиологические изменения при введении в сублетальных дозах или в период до того, как клетка станет биохимически инертной.При обнаружении клеткой эти изменения часто вызывают стрессовую реакцию. Некоторые ответы, такие как выработка белков теплового шока, могут служить для защиты клетки, тогда как другие, такие как активация процесса апоптоза, могут ускорить ее гибель. Тем не менее способность лекарств и токсинов с известной летальной биохимической активностью вызывать апоптотический ответ смерти вызвала большую путаницу в этой области.

Не только лекарства могут вызывать апоптотический ответ, но и нарушать физиологию клеток, так же как потеря экспрессии генов, сверхэкспрессия генов и экспрессия мутантных генов.Онкоген c- myc , например, может стимулировать апоптоз как при сверхэкспрессии (10, 11), так и при внезапном снижении его экспрессии (12). Регулирование апоптоза не является внутренней функцией подавляющего большинства лекарств и генов, но если цель лекарства — вызвать гибель раковых клеток, его способность вызывать самоубийство клеток косвенно может быть столь же важной, как и его прямая цитотоксическая активность. .

Ключевые биохимические события апоптоза

Учитывая, что в настоящее время существует более 80 000 публикаций по апоптозу, удивительно признать, что ключевое событие, вызывающее гибель клеток, все еще активно обсуждается.У нематоды Caenorhabditis elegans ключевым событием в запрограммированной гибели клеток является активация протеазы, называемой CED-3, и расщепление ее субстратов (13, 14). У червей с мутациями ced -3 не происходит запрограммированной гибели клеток. У млекопитающих есть около дюжины гомологов CED-3, которые вместе называются каспазами (15, 16). Хотя некоторые считают, что активация каспазы также окажется ключевым важным событием в апоптозе в клетках млекопитающих, большинство исследователей в настоящее время считают, что в большинстве случаев апоптоза ключевым событием является митохондриальная недостаточность из-за потери цитохрома с из межмембранных митохондрий. пробел (17, 18).

Во время запрограммированной гибели клеток у C.elegans протеаза CED-3 активируется адаптерным белком CED-4. Белок каспаза 9 млекопитающих наиболее близок к CED-3, а каспаза 9 может быть активирована Apaf-1, адаптерным белком, который напоминает CED-4, адаптер червя, необходимый для активации CED-3 (19-21).

В клетках млекопитающих Apaf-1 активируется цитохромом c после того, как он высвобождается из митохондрий (22). Затем белки Apaf-1 образуют мультисубъединичный комплекс с каспазой 9, называемый «апоптосомой», в котором каспаза 9 становится протеолитически активной (23).Каспаза 9 может расщеплять и активировать другие каспазы, такие как каспаза 3, которая расщепляет многие белки в клетке, включая ICAD, ингибитор эндонуклеазы (CAD), расщепляющей ДНК клетки (24), что можно определить как классическую лестницу электрофорезом (25, 26).

Хотя Apaf-1 похож на C.elegans CED-4, а caspase 9 похож на CED-3, между ними есть существенные различия. В отличие от Apaf-1, CED-4 не должен активироваться цитохромом c, и хотя CED-4 и CED-3 необходимы для запрограммированной гибели клеток у червя, гибель клеток в процессе развития происходит более или менее нормально, когда гены Apaf -1 или каспаза 9 удаляются у мышей, особенно когда они скрещиваются с фоном C57 / Bl6 (27-29).

Эксперименты с клеточными линиями, полученными от мышей, лишенных гена Apaf-1 или каспазы-9, показывают, что, хотя они необходимы для быстрого проявления апоптотического фенотипа, они не влияют на клонагенный потенциал клеток, лишенных факторов или обработанных химиотерапией ( 7). Таким образом, даже несмотря на то, что отсутствие Apaf-1 и каспазы-9 задерживало появление апоптотического фенотипа при гибели клеток, вызванной белком ретинобластомы или цитотоксическими препаратами (30), это не обязательно влияло на количество клеток, которые в конечном итоге погибали.

В отличие от червя, у млекопитающих есть дополнительный путь гибели клеток, который контролируется некоторыми членами семейства рецепторов фактора некроза опухоли (TNF), которые часто называют «рецепторами смерти». В этом пути, когда рецепторы, такие как рецептор TNF 2, CD95 (Fas / APO-1) и рецепторы TRAIL, лигируются, их цитоплазматические домены рекрутируют адаптерный белок FADD, который, в свою очередь, рекрутирует и активирует каспазу 8 и каспазу 10 (31, 32 ). Хотя активация этих каспаз может вызывать вторичное повреждение митохондрий, в большинстве клеток они могут вызывать гибель клеток независимо от митохондрий (33, 34).

Апоптоз регулируется членами семейства Bcl-2

В C.elegans запрограммированная гибель клеток ингибируется CED-9, который напрямую связывается с CED-4, не давая ему активировать CED-3. У млекопитающих есть много белков, подобных CED-9, известных под общим названием семейство Bcl-2, но ни один из этих белков не взаимодействует напрямую с Apaf-1, белком млекопитающих, наиболее похожим на CED-4 (35). Хотя существует общее согласие с тем, что члены семейства Bcl-2, включая сам Bcl-2, Mcl-1, Bcl-x и Bcl-w, могут ингибировать апоптоз, обеспечивать клонагенную защиту и действовать выше митохондрий, то, как они работают, — не так. известно (36).Эксперименты по делеции генов предоставляют доказательства того, что пути апоптоза, которые могут быть ингибированы с помощью Bcl-2, требуют для функционирования либо Bax, либо Bak, двух проапоптотических членов семейства Bcl-2 (37). Caenorhabditis elegans не имеет проапоптотических членов семейства Bcl-2, поэтому дает мало подсказок относительно того, как они функционируют. Одна из моделей состоит в том, что при получении апоптотического сигнала Bax и Bak агрегируются на внешней мембране митохондрий и образуют каналы, которые позволяют цитохрому с ускользать (38).

В дополнение к антиапоптотическим членам семейства Bcl-2 и проапоптотическим членам семейства Bax и Bak существует третье подсемейство Bcl-2-подобных белков, известных как белки «только Bh4», потому что они несут только один областей гомологии Bcl-2, Bh4 (39). Это проапоптотические белки. В C.elegans белок EGL-1, содержащий только Bh4, способствует гибели клеток, связываясь с CED-9 и вызывая высвобождение CED-4, который затем может активировать каспазу CED-3 (40). В клетках млекопитающих белки, содержащие только Bh4, такие как Bim, PUMA, Bid и Bad (и другие), могут связываться с антиапоптотическими членами семейства Bcl-2, такими как Bcl-2, Mcl-1, Bcl-w и Bcl-x, но Как это приводит к активации Бакса и Бака, остается загадкой.

Белки, содержащие только Bh4, контролируются транскрипцией, фосфорилированием, секвестрацией и расщеплением. Например, ген супрессора опухолей p53 индуцирует апоптоз путем транскрипционной активации гена PUMA, который может связываться с членами семейства антиапоптотических Bcl-2 и противодействовать им (41, 42). Bmf и Bim остаются неактивными в здоровых клетках за счет секвестрации на микротрубочках и миозине соответственно (43, 44). Bid активируется после расщепления каспазой 8 (45), а Bad регулируется фосфорилированием (46).

Ингибитор белков апоптоза (IAP) может регулировать гибель клеток после активации каспазы

Помимо белков, таких как Bcl-2, которые ингибируют гибель клеток перед митохондриями и до активации каспаз, существует еще одно семейство белков, называемых IAP, которые действуют после активации каспаз, связываясь с ними и предотвращая их расщепление. подложки (47). Все IAP несут один или несколько доменов бакуловирусных повторов IAP (BIR), и большинство из них также имеют домен RING, который позволяет им действовать как убиквитинлигазы E3.Наиболее хорошо охарактеризованным IAP млекопитающих является XIAP, который может связываться с каспазами 3, 7 и 9 и ингибировать их через свои BIR-домены (48).

Анализ IAP у Drosophila , DIAP1, показал, что ему противостоят небольшие проапоптотические белки Reaper, Grim, HID и Sickle (49, 50). Эти белки связывают BIR-домены DIAP через мотив взаимодействия, обнаруженный на их N-концах. У млекопитающих также есть ряд IAP-связывающих белков, которые имеют сходные N-концы, но в отличие от антагонистов IAP Drosophila , которые являются цитоплазматическими, большинство из них находится в митохондриях здоровых клеток (51).Эксперименты с использованием рекомбинантных белков показали, что ингибирование каспаз IAP может быть ослаблено добавлением этих антагонистов IAP in vitro .

Подавление апоптоза может привести к раку

Доказательства того, что ингибирование клеточной гибели может привести к раку, в основном происходят из-за природных катастроф, таких как транслокации в лимфомах и лейкозах. Для некоторых генов гибели клеток нокаут и трансгенные мыши предоставили доказательства, подтверждающие, что отказ от гибели клеток может вызвать рак.Хотя было проведено очень большое количество исследований, определяющих уровни экспрессии генов ингибиторов клеточной гибели при различных типах рака, эти исследования предоставляют только коррелятивные доказательства.

Фолликулярная лимфома и Bcl-2

Наиболее распространенным раком клеток крови у людей является фолликулярная лимфома В-клеточной неоплазии. Ген bcl-2 был идентифицирован, потому что он находится в точке останова транслокации t (14; 18), которая встречается в большинстве случаев.Эксперименты in vitro показали, что Bcl-2 может предотвращать апоптоз клеток, лишенных цитокинов, и показали, что он является первым онкогеном, который действует, подавляя гибель клеток, а не стимулируя пролиферацию клеток (3).

Экспрессия Bcl-2 у трансгенных мышей подтвердила, что ингибирование апоптоза может привести к раку, поскольку у этих мышей развиваются В-клеточные лимфомы и лейкозы (6, 52 — 54). Однако, хотя Bcl-2 является очень сильным ингибитором апоптоза, трансгенных мышей bcl-2 заболевают раком только в очень старом возрасте.Эти результаты предполагают, что ингибирование клеточной гибели является очень слабым онкогенным или, иными словами, апоптоз потенциальных злокачественных клеток не является мощным супрессором онкогенеза, по крайней мере, у мышей.

Хотя сама по себе экспрессия трансгена bcl-2 в лимфоидном компартменте трансгенных мышей не приводила к быстрому развитию опухолей, в сочетании с трансгеном c- myc лейкемии развивались чрезвычайно быстро, намного быстрее чем у мышей, несущих только один трансген (6).Этот мощный синергизм между онкогеном, индуцирующим рост, и ингибитором клеточной гибели может указывать на то, что апоптоз важен для предотвращения выживания клеток, которые уже имеют активирующие мутации в онкогенах, способствующих росту. Эти результаты предполагают, что клетки могут обнаруживать нарушения, вызванные активированным онкогеном, и задействовать механизм апоптоза. Блокирование апоптоза за счет сверхэкспрессии Bcl-2 или потери компонента пути передачи сигнала (такого как p53), который соединяет датчики повреждения с механизмом гибели клеток, может значительно облегчить развитие злокачественных новообразований.

р53

p53 является наиболее часто мутируемым геном при раке человека, но точно неизвестно, как он предотвращает развитие опухолей. Люди, гетерозиготные по мутациям потери функции p53 (синдром Ли-Фраумени), и мыши с одним или обоими удаленными аллелями p53 заболевают раком в раннем возрасте во многих различных тканях (55, 56). p53 выполняет две основные функции: он может вызывать остановку клеточного цикла путем транскрипционной активации гена ингибитора циклинкиназы p21 (57) и может вызывать апоптоз путем транскрипционной активации проапоптотических генов, особенно для белка PUMA, содержащего только Bh4 (41, 58).

Является ли индукция апоптоза или остановки клеточного цикла важной для супрессорной активности опухоли р53, неясно. Хотя лимфоидные клетки у трансгенных мышей bcl-2 столь же устойчивы к апоптозу из-за ионизирующего излучения и ДНК-мутагенов, как и у мутантных мышей p53 (59), трансгенные мыши bcl-2 имеют гораздо меньшую частоту лимфомы. (52). Точно так же у мышей, у которых отсутствуют гены PUMA или Bax и Bak, не развивается рак, частота которого приближается к частоте, наблюдаемой у p53 нулевых мышей, даже несмотря на то, что p53 требует PUMA для индукции апоптоза в ответ на повреждение ДНК, и считается, что все p53-опосредованные апоптозы требовать Bax и / или Bak.

Это означает, что способность p53 индуцировать апоптоз относительно не важна для его опухолевой супрессорной активности. С другой стороны, частота опухолей также не увеличивается заметно у мышей с делецией p21 и (60), поэтому эта активность p53 также, по-видимому, относительно не важна. Эти данные предполагают, что может существовать дополнительная активность p53, которая объясняет его способность действовать как опухолевый супрессор.

Недавно было высказано предположение, что p53 также может действовать независимо от регуляции транскрипции, чтобы напрямую связываться и ингибировать Bcl-x в митохондриях, что приводит к апоптозу (61).Поскольку ген для PUMA должен индуцироваться p53 после повреждения ДНК, а PUMA требуется для p53-опосредованного апоптоза (42), эта альтернативная активность p53, по-видимому, вряд ли представляет собой главный аспект проапоптотической активности p53 и, следовательно, не будет иметь значения для опосредованного p53 подавления опухоли.

Эксперименты по изучению установленных опухолей, экспрессирующих c-myc, или изучению трансформации клеток мышей, сконструированных для сверхэкспрессии myc, подтверждают идею о том, что способность p53 вызывать апоптоз может иметь важное значение для предотвращения прогрессирования опухоли после начального онкогенного события ( 62).Таким образом, неапоптотическая активность p53, например, вызывающая остановку клеточного цикла, может быть необходима для предотвращения первой онкогенной мутации, тогда как его способность индуцировать апоптоз может позволить ему замедлить последующие трансформирующие события.

ИПБ и паракаспасы

Транслокация с участием генов cIAP2 и паракаспазы обычно происходит в лимфомах, ассоциированных со слизистой оболочкой лимфоидной ткани (MALT) (63–65). Эта транслокация приводит к продукции слитого белка с N-концевой половиной, содержащей BIR-домены cIAP2, и C-концевой половиной, содержащей протеазоподобные части паракаспазы (66).Как этот слитый белок может вносить вклад в онкогенез, не определено, но возможности включают ингибирование апоптоза доменами BIR или активацию NFκB p52 районом паракаспазы. Транслокации, приводящие к повышенной экспрессии Bcl10, также связаны с лимфомой MALT (67, 68). Поскольку Bcl10 действует непосредственно перед паракаспазой в пути, необходимом для активации NFκB в ответ на лигирование рецептора антигена, кажется вероятным, что лимфомы MALT вызываются усилением передачи сигналов NFκB, а не прямым ингибированием каспаз с помощью IAP.

Корреляционные доказательства

Почти для всех про- и антиапоптотических белков были проведены исследования, демонстрирующие корреляцию между их экспрессией и различными типами рака. Например, в дополнение к фолликулярным лимфомам, несущим транслокаций bcl-2 и , повышенная экспрессия Bcl-2 была связана с прогрессированием меланомы (69), и как он, так и Mcl-1 наблюдались при некоторых миеломах (70, 71). ). Повышенные уровни XIAP наблюдались при мелкоклеточной карциноме легкого (72, 73), а экспрессия ML-IAP, по-видимому, ограничивается клетками меланомы (74–76).

Проблема с этими наблюдениями состоит в том, что обнаружение белка в раковых клетках не доказывает, что он участвовал в возникновении рака или требуется для его сохранения. Белок сурвивин, который ошибочно считался ингибитором клеточной гибели, поскольку он несет домен BIR, необходим для сегрегации хромосом во время деления клетки (77, 78). Этот сурвивин может быть обнаружен при многих формах рака, но некоторые нормальные ткани могут просто отражать тот факт, что некоторые клетки во всех формах рака делятся, тогда как большинство клеток в нормальных тканях взрослого человека находятся в G 0 (79).Тем не менее, поскольку клетки не могут делиться без сурвивина, он может оказаться отличной мишенью для новых химиотерапевтических средств против рака: ингибирование сурвивина (или его партнеров, INCENP и aurora B) может быть таким же хорошим или, возможно, лучше, чем таксол (78, 80) .

Доказательства от КО и трансгенных животных: модели in vivo / проверка

Можно иметь гораздо больше уверенности в том, что ингибитор апоптоза может действовать как онкоген или что промотор гибели клеток может действовать как супрессор опухоли, основываясь на данных, полученных в исследованиях трансгенных и нокаутных мышей.Если у трансгенных мышей с избыточной экспрессией ингибитора апоптоза наблюдается повышенная заболеваемость раком, онкогенный потенциал такого гена может быть подтвержден. Повышенная заболеваемость раком у мышей с целенаправленной делецией гена, который предположительно является промотором гибели клеток, подтверждает способность такого гена действовать как супрессор опухоли.

Даже если у мышей с удаленным геном или трансгенных мышей спонтанно не развивается рак, этих мышей можно скрещивать с мышами с сенсибилизированным генетическим фоном, которые, как известно, развивают рак с определенной скоростью, и скрещенных мышей можно контролировать, чтобы увидеть, есть ли рак начало ускоряется.Например, у мышей, у которых отсутствует ген только для Bh4-белка Bim, невысокая частота рака, но делеция Bim ускоряет развитие лимфомы у трансгенных мышей Eμ-myc, утверждая, что Bim может подавлять опухоли, индуцированные c-myc. (81). Точно так же, поскольку делеция Bax ускоряет начало опухоли у p53-дефицитных или трансгенных мышей c- myc , мы можем быть уверены, что Bax способен действовать как опухолевый супрессор (82, 83). Хотя исследования способности белка PUMA, содержащего только Bh4, подавлять неоплазию, еще предстоит продемонстрировать in vivo , эксперименты in vitro предполагают, что это весьма вероятно (84).

Другие антиапоптотические члены семейства Bcl-2 Mcl-1 и Bcl-xl действуют самостоятельно или в комбинации с другими онкогенами, способствуя развитию рака, когда они экспрессируются в лимфоидных клетках (83, 85) или β-клетках поджелудочной железы (12).

Хотя таким образом было показано, что члены семейства Bcl-2 способны либо стимулировать, либо защищать от развития рака, до сих пор было мало подтверждений in vivo , подтверждающих, что другие компоненты механизма гибели клеток влияют на рак.На сегодняшний день не было сообщений о спонтанном развитии опухоли или даже об ускорении начала опухоли у предрасположенных к опухоли мышей для трансгенных организмов, экспрессирующих другие ингибиторы клеточной гибели, или мышей, у которых проапоптотические гены удалены. Мыши, у которых были удалены Apaf-1 (86) или каспазы 1, 2, 3, 6, 7, 8, 9, 11 или 12, по-видимому, не имеют повышенной предрасположенности к раку. Мыши также не являются трансгенными по XIAP или ингибитору каспазы 8 CrmA. То, что у трансгенных мышей, экспрессирующих сурвивин в своих кератиноцитах, не развиваются спонтанно опухоли кожи или повышается частота опухолей при воздействии канцерогенов, подтверждает, что сурвивин не является онкогеном (87).

Противоопухолевые агенты могут вызывать апоптоз, но большинство из них могут также непосредственно убивать клетки

Апоптоз — обычная реакция на стресс

Одна из немногих областей в области клеточной смерти, с которой все согласны, заключается в том, что апоптоз раковых клеток был бы хорошим делом. Тем не менее, до сих пор остаются споры о том, насколько возможно попытаться заставить раковую клетку убить себя путем запрограммированной гибели клетки по сравнению с попыткой убить ее напрямую с помощью цитотоксического препарата (8).

Все клетки смертны, и все клетки могут быть убиты, если заблокирован процесс, необходимый для их выживания. Клинически полезные химиотерапевтические препараты ингибируют процессы, необходимые для роста или пролиферации, такие как блокирование продукции ДНК, мРНК или белка, прямое повреждение ДНК или ингибирование компонентов, необходимых для репликации ДНК или разделения хромосом. Клетки, обработанные таким образом, могут подвергнуться митотической катастрофе, потерять способность поддерживать активность плазматической мембраны или стать стареющими, даже если их реакция на апоптотический стресс была выведена из строя (88, 89).

Те же препараты вызывают апоптоз в тех клетках, в которых механизм апоптоза остается неизменным, что приводит к самоубийству клеток. Осложняющим фактором при анализе гибели клеток является тот факт, что апоптоз является распространенной реакцией на стресс, поэтому часто клетка, обработанная потенциально летальным токсином, не умирает из-за прямого воздействия токсина, но активирует свой механизм самоубийства, чтобы умирают раньше в результате апоптоза (90).

Прямая токсичность в сравнении с индукцией апоптотического стрессового ответа

В настоящее время неясно, насколько важен апоптоз по сравнению с прямой цитотоксичностью в ответе рака на химиотерапию.Поскольку невозможно создать жизнеспособных мышей, лишенных всех каспаз, так как мыши, лишенные генов каспазы 8, не являются жизнеспособными (28), невозможно изучить прямые токсические эффекты химиотерапии в отсутствие реакции на апоптотический стресс. Частично ответ на этот вопрос дал эксперименты, проведенные на клетках, сконструированных для сверхэкспрессии Bcl-2 (4, 91). В краткосрочных анализах эти клетки проявляют устойчивость ко многим различным лекарствам и радиации, но если вводить более высокие дозы лекарства или клетки подвергаются достаточно длительному воздействию, они все равно умирают, проявляя некротический вид, а не классический апоптотический фенотип.Клонагенные эксперименты проводятся очень редко. Они гораздо более важны, чем краткосрочные анализы, потому что они отвечают на вопрос, влияет ли ингибирование апоптоза при определенной дозе препарата на количество выживших клонагенных клеток (8). Количество клонагенных клеток определяет, может ли опухоль расти.

Терапевтический индекс и апоптоз нормальных клеток

Рак происходит из-за генных мутаций в одной клетке, но как потомство этой клетки пролиферирует, они подвержены дальнейшим генетическим изменениям.Популяции раковых клеток приходится конкурировать за пространство, питательные вещества и кислород, и наиболее устойчивые клетки выживают в процессе дарвиновского отбора. В общем, клетки, которые утратили важные компоненты механизма гибели клеток или сверхэкспрессируют ингибиторы гибели клеток, будут иметь преимущество. Раковые клетки, которые генетически устойчивы к апоптозу, также могут быть отобраны во время лучевой терапии или химиотерапии. В отличие от раковых клеток, нормальные клетки имеют неповрежденные механизмы запрограммированной гибели клеток, и, поскольку большинство методов лечения, предназначенных для уничтожения раковых клеток, также достигают нормальных клеток, они также могут подвергаться апоптозу, что приводит к побочным эффектам для органов, включая желудочно-кишечный тракт, костный мозг и кожу.

По этим причинам лечение рака, которое действует исключительно за счет индукции апоптоза и не имеет внутренней цитотоксичности, может вызвать гибель большего количества нормальных клеток, чем раковых клеток. Практически все эмпирически полученные эффективные методы лечения рака являются непосредственно токсичными и подавляют жизненно важные процессы, такие как репликация ДНК, синтез белка, функция микротрубочек и т. Д. уменьшить побочные эффекты, ограничивающие дозу, из-за апоптоза нормальных клеток.Ингибитор p53 пифитрин обеспечивает еще один подход к защите нормальных клеток от апоптоза, вызванного терапией рака (92, 93). При использовании в сочетании с лучевой или химиотерапией этот ингибитор не обеспечит дополнительных преимуществ для нулевых раковых клеток p53 , но может существенно уменьшить побочные эффекты. Однако существует теоретический риск того, что ингибирование p53 может вызвать новое злокачественное новообразование в другом месте.

Использование нашего понимания апоптоза в лечении рака

Новое понимание радиации, химиотерапии и стероидов

Большинство противоопухолевых средств, которые мы используем сегодня, были разработаны задолго до того, как апоптоз стал модной темой или его механизмы начали выясняться, а самые передовые новые методы лечения, основанные на нашем понимании апоптоза, все еще находятся на стадии клинических испытаний.Тем не менее, выяснение механизмов апоптоза и путей, которые его регулируют, позволило по-новому взглянуть на старые методы лечения.

Как in vitro , так и in vivo данные свидетельствуют о том, что большинство, если не все виды химиотерапии и радиотерапии могут вызывать апоптоз раковых клеток, но также обладают прямой токсической активностью. Подавляющее большинство из них индуцируют апоптоз косвенно, как ответ на стресс, вызванный их вмешательством во внутриклеточный метаболический путь.Один или два известных лекарства, такие как стероид дексаметазон, не являются токсичными по своей природе, но непосредственно вызывают апоптоз раковых клеток. Следует ожидать, что такие агенты будут быстро отбирать подмножества опухолевых клеток, которые утратили компоненты своего апоптотического механизма и, следовательно, являются устойчивыми. Таким образом, действуя в одиночку, эти лекарства вряд ли будут излечивающими, тогда как лекарства, которые по своей природе токсичны и блокируют жизненно важный метаболический путь, должны убивать клетки, даже если клетки неспособны к апоптотической реакции.

Лиганды рецепторов смерти

Хотя TNF не является полезным противоопухолевым агентом с клинической точки зрения, в некоторых моделях животных он может вызывать гибель опухолевых клеток. Теперь ясно, что он не действует непосредственно на раковые клетки, но действует на эндотелиальные клетки хозяина, необходимые для питания опухоли (94). Следовательно, можно использовать апоптоз для лечения рака косвенно, вмешиваясь в васкулогенез. Лиганды других рецепторов смерти, таких как TRAIL (95), по-видимому, работают путем прямой индукции апоптоза опухолевых клеток, поэтому, чтобы избежать отбора клеток, утративших рецепторы TRAIL, они, скорее всего, будут использоваться в сочетании с химиотерапией.

Антагонисты Bcl-2

Несколько подходов используются для стимулирования апоптоза раковых клеток путем противодействия членам семейства Bcl-2 или снижения их уровней. Препарат на основе антисмыслового нуклеотида к bcl-2 проходит испытания на широком спектре различных видов рака (96). Антагонисты Bcl-2 / Bcl-x, разработанные для имитации пептидов, содержащих только Bh4, разрабатываются рядом групп (97 — 100). Эти агенты можно использовать для лечения фолликулярной лимфомы, при которой повышенные уровни Bcl-2 способствуют возникновению заболевания, но также в комбинации с обычными химиотерапевтическими агентами, чтобы проверить, приведет ли снижение Bcl-2 или Bcl-x к увеличению доли опухолевых клеток. различные типы апоптоза.

Миметики Smac / Diablo

В Drosophila IAP противостоят Grim, HID, Reaper и Sickle, маленьким цитоплазматическим белкам, которые имеют сходные N-концы, с помощью которых они связываются с IAP. У млекопитающих есть ряд митохондриальных белков со схожими N-концами, которые могут связываться с IAP в цитоплазме, как только они высвобождаются из митохондрий. In vitro небольших пептидов, соответствующих N-концу этих белков, как было показано, способны противодействовать ингибированию каспаз с помощью XIAP, и они используются в качестве основы для разработки терапевтических средств антагонистов IAP (101-103).

Герцептин, Гливек и Иресса

Недавно был разработан ряд агентов, которые не действуют непосредственно на эффекторный механизм клеточной гибели, но блокируют передачу сигналов роста и выживания дальше в обратном направлении. Герцептин подавляет тирозинкиназу плазматической мембраны рецептора-2 эпидермального фактора роста (HER2 / neu), экспрессия которой повышается за счет амплификации гена при многих формах рака молочной железы (104). Iressa подавляет передачу сигналов рецептором эпидермального фактора роста (EGF-R) и была испытана для лечения рака легких (105).Наиболее успешным агентом является гливек, который ингибирует тирозинкиназу Abl, активируемую филадельфийскими транслокациями при ХМЛ (106). Эти агенты, вероятно, вызывают те же эффекты, что и удаление зависимых от фактора клеток из источника фактора роста, останавливая цикл клеток, а также вызывая активацию механизма апоптоза по умолчанию. Какой из этих эффектов является наиболее терапевтическим, неизвестно.

Ритуксимаб

Одним из наиболее многообещающих средств для лечения неходжкинской лимфомы является моноклональное антитело против В-клеточного антигена B220 (ритуксимаб).Как это антитело приводит к гибели клеток лимфомы, неизвестно, но предполагаемые механизмы включают индукцию апоптоза, активацию антителозависимой клеточной цитотоксичности или опосредованный комплементом лизис (107).

Комплекс p53 – MDM2

Были разработаны новые агенты, которые связываются с MDM2, вытесняя p53 и тем самым активируя путь p53, что приводит к остановке клеточного цикла и апоптозу (108). Такие агенты будут иметь преимущество в том, что они не влияют на нормальные клетки, и можно ожидать, что они будут хорошо работать против опухолей, сверхэкспрессирующих MDM2, но могут быстро отбирать раковые клетки, которые потеряли или мутировали p53.

Выводы

Теперь ясно, что нарушение нормального процесса самоубийства клеток является важным и частым фактором, способствующим развитию рака. Однако значение индукции апоптоза при лечении рака остается неясным. Хотя апоптоз раковых клеток желателен (единственная хорошая раковая клетка — это мертвая раковая клетка) и многие известные и новые методы лечения рака вызывают апоптоз как in vitro , так и in vivo , мы все еще не знаем, насколько важен апоптоз по сравнению с прямая токсичность.Мы также не знаем, в какой степени экспрессия генов, ингибирующих апоптоз, способствует устойчивости к терапии рака. Однако быстрый прогресс в области апоптоза и новых агентов на всех этапах разработки дает основания для оптимизма.

D.L.V. поддерживается грантом центра Общества лейкемии и лимфомы и грантами Австралийского национального комитета здравоохранения.

Список литературы

1.

Керр, Дж. Ф., Уилли, А. Х. и Карри, А. (

1972

) Апоптоз: основное биологическое явление с широким спектром влияния на кинетику тканей.

руб. J. Рак

,

26

,

239

–257. 2.

Сирл, Дж., Лоусон, Т.А., Эбботт, П.Дж., Хармон, Б. и Керр, Дж. Ф. (

1975

) Электронно-микроскопическое исследование способа гибели клеток, вызванного химиотерапевтическими агентами против рака, в популяциях пролиферирующих нормальных и неопластических клеток.

J. Pathol.

,

116

,

129

–138.3.

Во, Д.Л., Кори, С. и Адамс, Дж. (

1988

) Ген Bcl-2 способствует выживанию гемопоэтических клеток и взаимодействует с c-myc для иммортализации пре-B-клеток.

Природа

,

335

,

440

–442. 4.

Штрассер, А., Харрис, А.В. и Кори, С. (

1991

) Трансген bcl-2 ингибирует гибель Т-клеток и нарушает самоцензуру тимуса.

Ячейка

,

67

,

889

–999. 5.

Цудзимото, Ю. (

1989

) Стрессоустойчивость, обеспечиваемая высоким уровнем белка bcl-2 альфа в B-лимфобластоидной клетке человека.

Онкоген

,

4

,

1331

–1336. 6.

Штрассер, А., Харрис, А.В., Бат, М.Л. и Кори, С. (

1990

) Новые примитивные лимфоидные опухоли, индуцированные у трансгенных мышей кооперацией между myc и bcl-2.

Природа

,

348

,

331

–333. 7.

Экерт П.Г., Рид С.Х., Силке Дж., Марсден В.С., Кауфманн Х., Хокинс К.Дж., Герл Р., Кумар С. и Во, Д.Л. (

2004

) Apaf-1 и каспаза-9 ускоряют апоптоз, но не определяют, умирают ли клетки, лишенные фактора или обработанные лекарством.

J. Cell Biol.

,

165

,

835

–842. 8.

Таннок, И.Ф. и Ли, С. (

2001

) Доказательства против апоптоза как основного механизма гибели репродуктивных клеток после обработки клеточных линий противораковыми препаратами.

руб. J. Рак

,

84

,

100

–105. 9.

Во, Д.Л. (

2002

) Апоптоз и токсикология — какое значение имеет?

Токсикология

,

181/182

,

3

–7. 10.

Эван, Г.И., Уилли, А.Х., Гилберт, К.С., Литтлвуд, Т.Д., Лэнд, Х., Брукс, М., Уотерс, К.М., Пенн, Л.З. и Хэнкок, округ Колумбия. (

1992

) Индукция апоптоза фибробластов белком c-myc.

Ячейка

,

69

,

119

–128. 11.

Аскью, Д.С., Ашмун, Р.А., Симмонс, Британская Колумбия. и Кливленд, J.L. (

1991

) Конститутивная экспрессия c-myc в IL-3-зависимой миелоидной клеточной линии подавляет остановку клеточного цикла и ускоряет апоптоз.

Онкоген

,

6

,

1915

–1922. 12.

Пеленгарис С., Хан М. и Эван, Г.И. (

2002

Подавление Myc-индуцированного апоптоза в бета-клетках проявляет многочисленные онкогенные свойства Myc и запускает канцерогенное развитие.

Ячейка

,

109

,

321

–334.13.

Юань, Дж. Я., Шахам, С., Леду, С., Эллис, Х. М. и Хорвиц, Х. (

1993

) C.elegans Ген клеточной смерти ced 3 кодирует белок, подобный ферменту, преобразующему бета интерлейкин 1 млекопитающих.

Ячейка

,

75

,

641

–652. 14.

Эллис, Х. и Хорвиц, Х.Р. (

1986

) Генетический контроль запрограммированной гибели клеток нематод. C.elegans .

Ячейка

,

44

,

817

–829. 15.

Николсон, Д.В. и Thornberry, N.A. (

1997

) Каспазы — протеазы-киллеры.

Trends Biochem.Sci.

,

22

,

299

–306. 16.

Коэн, Г. (

1997

) Каспасы — палачи апоптоза.

Biochem. J.

,

326

,

1

–16. 17.

Лю X.S., Ким C.N., Ян Дж., Джеммерсон Р. и Ван Х.Д. (

1996

) Индукция апоптотической программы в бесклеточных экстрактах — потребность в datp и цитохроме c.

Ячейка

,

86

,

147

–157. 18.

Десагер, С. и Мартину, Дж. (

2000

) Митохондрии как центральная контрольная точка апоптоза.

Trends Cell Biol.

,

10

,

369

–377. 19.

Ву Д.Ю., Валлен Х.Д., Инохара Н. и Нуньес, Г. (

1997

) Взаимодействие и регулирование Caenorhabditis elegans смерть протеазы ced-3 от ced-4 и ced-9.

J. Biol. Chem.

,

272

,

21449

–21454.20.

Спектор, М.С., Деснуайер, С., Хёппнер, Д.Дж. и Хенгартнер М.О. (

1997

) Взаимодействие между регуляторами клеточной смерти c-elegans ced-9 и ced-4.

Природа

,

385

,

653

–656. 21.

Ву, Д.Ю., Валлен, Х.Д. и Нуньес, Г. (

1997

) Взаимодействие и регуляция субклеточной локализации ced-4 с помощью ced-9.

Наука

,

275

,

1126

–1129. 22.

Ли, П., Ниджхаван, Д., Будихардджо, И., Шринивасула, С.М., Ахмад, М., Алнемри, Е.С. и Ван, X.D. (

1997

) Цитохром c и datp-зависимое образование комплекса apaf-1 / каспаза-9 запускает каскад апоптотических протеаз.

Ячейка

,

91

,

479

–489.23.

Ши, Ю.Г. (

2002

) Апоптосома: клеточный двигатель для активации каспазы-9.

Конструкция

,

10

,

285

–288. 24.

Энари, М., Сакахира, Х., Йокояма, Х., Окава, К., Ивамацу, А. и Нагата, С. (

1998

) Активированная каспазой ДНК, которая разрушает ДНК во время апоптоза, и ее ингибитор ICAD.

Природа

,

391

,

43

–50. 25.

Хьюиш, Д. и Бургойн, Л. (

1973

) Субструктура хроматина. Переваривание ДНК хроматина в регулярно расположенных сайтах ядерной дезоксирибонуклеазой.

Biochem. Биофиз. Res. Commun.

,

52

,

504

–510.26.

Уильямс, Дж. Р., Литтл, Дж. Б. и Шипли, W.U. (

1974

) Ассоциация гибели клеток млекопитающих со специфической эндонуклеолитической деградацией ДНК.

Природа

,

252

,

754

–755. 27.

Хонарпур, Н., Ду, С.Ю., Ричардсон, Дж. А., Хаммер, Р. Э., Ван, X.D. и Герц, Дж. (

2000

Взрослые мыши с дефицитом Apaf-1 демонстрируют мужское бесплодие.

Dev. Биол.

,

218

,

248

–258. 28.

Чжэн, Т. и Флавелл Р.А. (

2000

) Гадания и сюрпризы: генетический анализ функции каспаз у мышей.

Exp. Cell Res.

,

256

,

67

–73. 29.

Леонард, Дж. Р., Клок, Б. Дж., Д’Са, К., Флавелл, Р. А. и Рот, К.А. (

2002

) Штамм-зависимые аномалии развития нервной системы у мышей с дефицитом каспазы-3.

J. Neuropathol. Exp. Neurol.

,

61

,

673

–677. 30.

Хо А.Т., Ли К.Х., Хакем Р., Мак Т.В. и Zacksenhaus, E. (

2004

) Связывание каспазы-9 с Apaf1 в ответ на потерю pRb или цитотоксических препаратов зависит от типа клеток.

EMBO J.

,

23

,

460

–472. 31.

Ашкенази, А. и Диксит В. (

1999

) Контроль апоптоза рецепторами гибели и распада.

Curr. Opin. Cell, Biol.

,

11

,

255

–260. 32.

Штрассер, А., О’Коннор, Л. и Диксит В. (

2000

) Передача сигналов апоптоза.

Annu. Rev. Biochem.

,

69

,

217

–245. 33.

Тевари, М. и Диксит В. (

1995

Апоптоз, индуцированный Fas- и фактором некроза опухоли, ингибируется продуктом гена crma поксвируса.

Дж.Биол. Chem.

,

270

,

3255

–3260. 34.

Штрассер, А., Харрис, А.В., Хуанг, округ Колумбия, Краммер, П.Х. и Кори, С. (

1995

) Bcl-2 и fas / apo-1 регулируют различные пути апоптоза лимфоцитов.

EMBO J.

,

14

,

6136

–6147.35.

Морииши К., Хуанг, округ Колумбия, Кори С. и Адамс, Дж. (

1999

) Члены семейства Bcl-2 не ингибируют апоптоз, связывая активатор каспазы Apaf-1.

Proc. Natl Acad. Sci. США

,

96

,

9683

–9688. 36.

Адамс, Дж. (

2003

) Способы умирания: множественные пути к апоптозу.

Genes Dev.

,

17

,

2481

–2495. 37.

Линдстен Т., Росс А.Дж., Кинг А. и др. . (

2000

Комбинированные функции проапоптотических членов семейства Bcl-2, Bak и Bax, необходимы для нормального развития множества тканей.

Мол. Ячейка

,

6

,

1389

–1399.38.

Вэй, М.К., Цзун, В.Х., Ченг, Э.Х.Й. и др. . (

2001

) Проапоптотические BAX и BAK: необходимые ворота к митохондриальной дисфункции и смерти.

Наука

,

292

,

727

–730. 39.

Булье, П. и Штрассер, А. (

2002

) Bh4-only белки — эволюционно консервативные проапоптотические члены семейства Bcl-2, необходимые для запуска запрограммированной гибели клеток.

J. Cell Sci.

,

115

,

1567

–1574. 40.

Чен Ф.Л., Херш Б.М., Конрад Б., Чжоу З., Ример Д., Грюнбаум Ю. и Хорвиц, Х. (

2000

) Перемещение C.elegans CED-4 к ядерным мембранам во время запрограммированной гибели клеток.

Наука

,

287

,

1485

–1489.41.

Накано, К. и Vousden, K.H. (

2001

) PUMA, новый проапоптотический ген, индуцируется p53.

Мол. Ячейка

,

7

,

683

–694. 42.

Виллунгер А., Михалак Э.М., Култас Л., Муллауэр Ф., Бок Г., Ауссерлехнер М.Дж., Адамс Дж. и Штрассер, А. (

2003

) апоптотические реакции, индуцированные р53 и лекарственными средствами, опосредованные белками, содержащими только Bh4, puma и noxa. Наука , 302 , 1036–1038. 43.

Путхалакат, Х., Хуанг, округ Колумбия, О’Рейли, Лос-Анджелес, Кинг, С. и Штрассер, А. (

1999

Проапоптотическая активность Bim, члена семейства Bcl-2, регулируется взаимодействием с моторным комплексом динеина.

Мол. Ячейка

,

3

,

287

–296.44.

Путхалакат, Х., Виллунгер, А., О’Рейли, Л.А., Бомонт, Дж. Дж., Култас, Л., Чейни, Р.Э., Хуанг, округ Колумбия. и Штрассер, А. (

2001

Bmf: проапоптотический белок Bh4, регулируемый взаимодействием с моторным комплексом актина миозина V, активируемым аноикисом.

Наука

,

293

,

1829

–1832. 45.

Ли, Х.Л., Чжу, Х., Сюй, К.Дж. и Юань, Дж. (

1998

) Расщепление bid каспазой 8 опосредует повреждение митохондрий в fas-пути апоптоза.

Ячейка

,

94

,

491

–501. 46. ​​

Чжа Дж. П., Харада Х., Ян Э., Джокель Дж. и Корсмейер, С.Дж. (

1996

) Плохое фосфорилирование серина агониста смерти в ответ на фактор выживания приводит к связыванию с 14-3-3, а не с bgl-x (l).

Ячейка

,

87

,

619

–628. 47.

Сальвесен, Г. и Дакетт К.С. (

2002

) Белки IAP: преграждают путь к двери смерти.

Nature Rev. Mol. Cell Biol.

,

3

,

401

–410. 48.

Ши, Ю.Г. (

2002

) Механизмы активации и ингибирования каспаз при апоптозе.

Мол. Ячейка

,

9

,

459

–470. 49.

Ю, С.Дж., Ха, Дж. Р., Муро, И. и др. . (

2002

) Hid, Rpr и Grim негативно регулируют уровни DIAP1 посредством различных механизмов.

Nature Cell Biol.

,

4

,

416

–424. 50.

Захариу А., Тенев Т., Гоял Л., Агапите Дж., Стеллер Х. и Мейер, П. (

2003

) IAP-антагонисты проявляют неизбыточные способы действия посредством дифференциального связывания DIAP1.

EMBO J.

,

22

,

6642

–6652.51.

Во, Д.Л. и Силке, Дж. (

2003

) Связывающие белки митохондриального IAP млекопитающих.

Biochem. Биофиз. Res. Commun.

,

304

,

499

–504. 52.

Штрассер, А., Харрис, А.В. и Кори, С. (

1993

) Трансген E mu-bcl-2 способствует спонтанной трансформации ранних пре-B и секретирующих иммуноглобулин клеток, но не Т-клеток.

Онкоген

,

8

,

1

–9. 53.

Макдоннелл, Т.Дж. и Корсмейер, С.Дж. (

1991

) Прогрессирование от лимфоидной гиперплазии до злокачественной лимфомы высокой степени у мышей, трансгенных по t (14; 18).

Природа

,

349

,

254

–256.54.

Эгл А., Харрис А. В., Бат, М. Л., О’Рейли, Л. и Кори, С. (

2004

) У трансгенных мышей VavP-Bcl2 развивается фолликулярная лимфома, которой предшествует гиперплазия зародышевого центра.

Кровь

,

103

,

2276

–2283. 55.

Донехауэр, Л.А., Харви, М., Слэгл, Б.Л., МакАртур, М.Дж., Монтгомери, К.Дж., Бутель, Дж. и Брэдли, А. (

1992

) Мыши, дефицитные по р53, имеют нормальное развитие, но подвержены спонтанным опухолям.

Природа

,

356

,

215

–221. 56.

Лейн, Д. (

1992

) Рак. p53, хранитель генома.

Природа

,

358

,

15

–16.57.

Эль-Дейри В.С., Токино Т., Велкулеску В.Э. и др. . (

1993

) WAF1, потенциальный медиатор подавления опухоли p53.

Ячейка

,

75

,

817

–825. 58.

Ю. Дж., Чжан Л., Хван П. М., Кинзлер К. В. и Фогельштейн Б. (

2001

) PUMA вызывает быстрый апоптоз клеток колоректального рака.

Мол. Ячейка

,

7

,

673

–682. 59.

Штрассер, А., Харрис, А.В., Джекс, Т. и Кори, С. (

1994

) Повреждение ДНК может вызывать апоптоз в пролиферирующих лимфоидных клетках через p53-независимые механизмы, ингибируемые Bcl-2.

Ячейка

,

79

,

329

–339.60.

Дэн К. Х., Чжан П. М., Харпер Дж. У., Элледж С. Дж. и Ледер П. (

1995

) Мыши, лишенные p21 (c / p1 / waf1), проходят нормальное развитие, но дефектны в контроле контрольной точки g1.

Ячейка

,

82

,

675

–684. 61.

Михара М., Эрстер С., Заика А., Петренко О., Читтенден Т., Панкоска П.и Молл, У. (

2003

) p53 играет прямую апоптогенную роль в митохондриях.

Мол. Ячейка

,

11

,

577

–590. 62.

Шмитт К.А., Фридман Дж.С., Янг М., Баранов Э., Хоффман Р.М. и Лоу, С.В. (

2002

) Рассечение опухолевых супрессорных функций p53 in vivo .

Раковые клетки

,

1

,

289

–298. 63.

Судзуки Х., Мотеги М., Акаги Т., Хосокава Ю. и Сето М. (

1999

) API1-MALT1 / MLT участвует в лимфоме лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой оболочкой, с t (11; 18) (q21; q21).

Кровь

,

94

,

3270–3271

.64.

Морган, Дж. А., Инь, Ю., Боровски, А. Д. и др. . (

1999

Точки разрыва t (11; 18) (q21; q21) в лимфоме, ассоциированной со слизистой оболочкой лимфоидной ткани (MALT), лежат внутри или рядом с ранее не описанным геном MALT1 в хромосоме 18.

Cancer Res.

,

59

,

6205

–6213.65.

Дирламм, Дж., Баенс, М., Влодарска, И. и др. . (

1999

Ген ингибитора апоптоза API2 и новый ген 18q, MLT, рекуррентно реаранжируются в t (11; 18) (q21; q21), ассоциированном с лимфомами лимфоидной ткани, ассоциированными со слизистой оболочкой.

Кровь

,

93

,

3601

–3609.66.

Урен А.Г., О’Рурк К., Аравинд Л., Писабарро М.Т., Сешагири С., Кунин Э.В. и Диксит В. (

2000

) Идентификация паракаспаз и метакаспаз: двух древних семейств каспазоподобных белков, один из которых играет ключевую роль в лимфоме MALT.

Мол. Ячейка

,

6

,

961

–967. 67.

Лукас, П.К., Ёнедзуми, М., Инохара, Н., Макаллистер-Лукас, Л.М., Абазид, М.Э., Чен, Ф.Ф., Ямаока, С., Сето, М. и Нуньес, Г. (

2001

) Bcl10 и MALT1, независимые мишени хромосомной транслокации в лимфоме MALT, взаимодействуют в новом сигнальном пути NF-kappa B.

J. Biol. Chem.

,

276

,

19012

–19019. 68.

Уиллис, Т.Г., Джадаэль, Д.М., Ду, М.К. и др. . (

1999

) Bcl10 участвует в t (1; 14) (p22; q32) B-клеточной лимфомы MALT и мутирует во множестве типов опухолей.

Ячейка

,

96

,

35

–45. 69.

Лейтер У., Шмид Р.М., Каскель П., Питер Р.У. и Krahn, G. (

2000

) Антиапоптотические bcl-2 и bcl-xL при запущенной злокачественной меланоме.

Arch. Дерматол. Res.

,

292

,

225

–232. 70.

Петтерссон, М., Джернберг-Виклунд, Х., Ларссон, Л.Г., Сандстрем, Ч., Гивол, И., Цудзимото, Ю. и Нильссон К. (

1992

) Экспрессия гена bcl-2 в клеточных линиях множественной миеломы человека и нормальных плазматических клетках.

Кровь

,

79

,

495

–502.71.

Журдан М., Вейрун Дж. Л., Вос Дж. Д., Редал Н., Кудерк Дж. и Кляйн Б. (

2003

) Основная роль антиапоптотического белка Mcl-1 в индуцированном IL-6 выживании клеток миеломы человека.

Онкоген

,

22

,

2950

–2959. 72.

Экедаль Дж., Джозеф Б., Григорьев М.Ю., Мюллер М., Магнуссон К., Левенсон Р. и Животовский Б. (

2002

) Экспрессия ингибитора белков апоптоза в клетках мелкоклеточной и немелкоклеточной карциномы легкого.

Exp. Cell Res.

,

279

,

277

–290. 73.

Хофманн, Х.С., Симм, А., Хаммер, А., Зильбер, Р. и Бартлинг, Б. (

2002

) Экспрессия ингибиторов белков апоптоза (IAP) при немелкоклеточном раке легкого человека.

J. Cancer Res. Clin. Онкол.

,

128

,

554

–560. 74.

Чиодино, К., Чезинаро, А.М., Оттани, Д., Фантини, Ф., Джаннетти, А., Трентини, Г.П. и Пинцелли, С. (

1999

) Экспрессия нового ингибитора апоптоза сурвивина в нормальной и опухолевой коже.

J. Invest. Дерматол.

,

113

,

415

–418.75.

Вучич, Д., Стеннике, Х.Р., Писабарро, М.Т., Сальвесен, Г.С. и Диксит В. (

2000

ML-IAP, новый ингибитор апоптоза, который преимущественно экспрессируется в меланомах человека.

Curr. Биол.

,

10

,

1359

–1366. 76.

Касоф, Г. и Гомеш, Британская Колумбия. (

2001

) Ливин, новый ингибитор члена семейства белков апоптоза.

J. Biol. Chem.

,

276

,

3238

–3246. 77.

Скуфиас Д.А., Моллинари К., Лакруа Ф. и Марголис Р.Л. (

2000

) Человеческий сурвивин — это белок-пассажир, связанный с кинетохорами.

J. Cell Biol.

,

151

,

1575

–1581.78.

Урен А.Г., Вонг Л., Пакуш М., Фаулер К.Дж., Берроуз Ф.Дж., Во, Д.Л. и Чу, K.H.A. (

2000

) Сурвивин и белок внутренней центромеры INCENP демонстрируют сходную локализацию клеточного цикла и фенотип нокаута гена.

Curr. Биол.

,

10

,

1319

–1328. 79.

Силке, Дж. и Во, Д.Л. (

2001

) Два вида белков, содержащих BIR — ингибиторы апоптоза или необходимые для митоза.

J. Cell Sci.

,

114

,

1821

–1827. 80.

Карвалью, А., Кармена, М., Самбаде, К., Эрншоу, В. и Уитли, С. (

2003

Сурвивин необходим для стабильной активации контрольной точки в обработанных таксолом клетках HeLa.

J. Cell Sci.

,

116

,

2987

–2998. 81.

Эгле, А., Харрис, А.В., Булье, П. и Кори, С. (

2004

Bim является супрессором Myc-индуцированного В-клеточного лейкоза мыши.

Proc. Natl Acad. Sci. США

,

12

,

12

.82.

Eischen, C.M., Roussel, M.F., Korsmeyer, S.J. и Кливленд, J.L. (

2001

Потеря Bax нарушает Myc-индуцированный апоптоз и препятствует отбору мутаций p53 во время Myc-опосредованного лимфомагенеза.

Мол. Клетка. Биол.

,

21

,

7653

–7662. 83.

Суонсон П.Дж., Куслак С.Л., Фанг В. и др. . (

2004

Смертельный острый лимфобластный лейкоз у мышей, трансгенных по Bcl-xL и c-myc, ограниченным B-клетками.

J. Immunol.

,

172

,

6684

–6691. 84.

Hemann, M.T., Zilfou, J.T., Zhao, Z., Burgess, D.J., Hannon, G.J. и Лоу, С.В. (

2004

) Подавление онкогенеза p53-мишенью PUMA.

Proc. Natl Acad. Sci. США

,

101

,

9333

–9338. 85.

Чжоу П., Леви Н. Б., Се Х., Цянь Л., Ли С. Ю., Гаскойн Р. Д. и Крейг Р.В. (

2001

) Трансгенные мыши MCL1 демонстрируют высокую частоту В-клеточной лимфомы, проявляющейся как спектр гистологических подтипов.

Кровь

,

97

,

3902

–3909.86.

Скотт, К.Л., Шулер, М., Марсден, В.С. и др. . (

2004

) Apaf-1 и каспаза-9 не действуют как опухолевые супрессоры при myc-индуцированном лимфомагенезе или трансформации фибробластов эмбриона мыши.

J. Cell Biol.

,

164

,

89

–96. 87.

Аллен, С.М., Флорелл С.Р., Хэнкс А.Н., Александер А., Дидрих М.Дж., Алтьери, округ Колумбия. и Гроссман Д. (

2003

Экспрессия сурвивина в коже мышей предотвращает регресс папилломы и способствует химически индуцированному прогрессированию опухоли.

Cancer Res.

,

63

,

567

–572. 88.

Браун, Дж. и Воутерс Б.Г. (

1999

) Апоптоз, р53 и чувствительность опухолевых клеток к противоопухолевым агентам.

Cancer Res.

,

59

,

1391

–1399. 89.

Кауфманн, С. и Хенгартнер М.О. (

2001

) Запрограммированная смерть клеток: живы и здоровы в новом тысячелетии.

Trends Cell Biol.

,

11

,

526

–534. 90.

Кауфманн, С. и Во, Д.Л. (

2003

) Изменения в аппарате апоптоза и их потенциальная роль в устойчивости к противоопухолевым препаратам.

Онкоген

,

22

,

7414

–7430. 91.

Сентман, К.Л., Шаттер, Дж. Р., Хоккенбери, Д., Канагава, О. и Корсмейер, С.Дж. (

1991

) bcl-2 подавляет множественные формы апоптоза, но не отрицательный отбор в тимоцитах.

Ячейка

,

67

,

879

–888. 92.

Лю X., Чуа К.С., Гао Дж., Чен З., Лэнди К.Л., Хамди Р. и Чуа, Б. (

2004

) Пифитрин-{альфа} защищает от апоптоза, вызванного доксорубицином, и острой кардиотоксичности у мышей.

Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.

,

286

,

H933

–H939.93.

Комаров П.Г., Комарова Е.А., Кондратов Р.В., Христов-Целков К., Енот Ю.С., Чернов М.В. и Гудков А. (

1999

) Химический ингибитор р53, который защищает мышей от побочных эффектов лечения рака.

Наука

,

285

,

1733

–1737. 94.

Штулкер Б., Руланд Б., Хелганс Т., Блюзманн, Х., Лютер, Т. и Маннел, Д. (

2000

Фактор некроза опухоли индуцирует некроз опухоли через эндотелиальные клетки сосудистой сети опухоли, экспрессирующие рецептор фактора некроза опухоли типа 1.

Am. J. Pathol.

,

156

,

1171

–1176. 95.

ЛеБлан, Х. и Ашкенази, А. (

2003

) Apo2L / TRAIL и его рецепторы гибели и распада.

Cell Death Differ.

,

10

,

66

–75. 96.

Франкель, С. (

2003

) Облимерсен натрия (антисмысловой олигонуклеотид G3139 Bcl-2) при макроглобулинемии Вальденстрема: целевой подход к усилению апоптоза.

Семин. Онкол.

,

30

,

300

–304.97.

Баэлл, Дж. и Хуанг, округ Колумбия. (

2002

) Перспективы нацеливания на семейство белков Bcl-2 для разработки новых цитотоксических препаратов.

Biochem. Pharmacol.

,

64

,

851

–863. 98.

Куцки О., Парк Х.С., Эрнст Дж. Т., Орнер Б. П., Инь Х. и Гамильтон, А. (

2002

) Разработка мощного антагониста Bcl-x (L) на основе мимикрии альфа-спирали.

J. Am. Chem. Soc.

,

124

,

11838

–11839. 99.

Бекаттини Б., Китада С., Леоне М., Моносов Э., Чандлер С., Чжай Д., Киппс Т.Дж., Рид Дж. и Pellecchia, M. (

2004

) Рациональный дизайн и обнаружение в клетке проапоптотической активности нового соединения, нацеленного на bcl-x (l), в реальном времени.

Chem.Биол.

,

11

,

389

–395. 100.

Цянь Дж., Ворбах М. Дж., Хут Дж. Р. и др. . (

2004

) Открытие новых ингибиторов Bcl-xL с использованием нескольких платформ для высокопроизводительного скрининга.

Анал. Biochem.

,

328

,

131

–138.101.

Шиммер, А.Д., валлийский, К., Пинилла, К. и др. . (

2004

) Низкомолекулярные антагонисты супрессора апоптоза XIAP проявляют широкую противоопухолевую активность.

Раковые клетки

,

5

,

25

–35. 102.

Франклин М.С., Кадходян С., Акерли Х. и др. . (

2003

) Анализ структуры и функций пептидных антагонистов меланомного ингибитора апоптоза (ML-IAP).

Биохимия

,

42

,

8223

–8231. 103.

Арнт, К.Р., Чиориан, М.В., Хельдебрант, М.В., Горс, Г.Дж. и Кауфманн, С. (

2002

) Синтетические пептиды Smac / DIABLO усиливают действие химиотерапевтических агентов за счет связывания XIAP и cIAP1 на месте .

J. Biol. Chem.

,

277

,

44236

–44243. 104

Чжоу, Б. и Hung, M.C. (

2003

) Нарушение регуляции клеточной передачи сигналов с помощью HER2 / neu при раке груди.

Семин. Онкол.

,

30

,

38

–48. 105.

Уэйклинг, А. (

2002

) Ингибиторы тирозинкиназы рецептора эпидермального фактора роста.

Curr. Opin. Pharmacol.

,

2

,

382

–387. 106.

Capdeville, R., Buchdunger, E., Zimmermann, J. и Материя, А. (

2002

) Гливек (STI571, иматиниб), рационально разработанный противоопухолевый препарат таргетного действия.

Nature Rev. Drug Discov.

,

1

,

493

–502. 107.

Картрон, Дж., Уотьер, Х., Голей, Дж. и Солаль-Селиньи, П. (

2004

) От скамейки к постели: способы повышения эффективности ритуксимаба.

Кровь

,

104

,

2635

–2642.108.

Василев Л.Т., Ву Б.Т., Грейвс Б. и др. . (

2004

) In vivo активация пути p53 низкомолекулярными антагонистами MDM2.

Наука

,

303

,

844

–848.

Канцерогенез об.26 номер 2 © Oxford University Press, 2005; все права защищены.

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.